实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：肉毒杆菌A/B型（CB-A/B）PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P64178
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：2次
替卡西林(标准品) Ticarcillin disodium salt 4697-14-7 质量规格：含量测定，二钠盐
1,3-二羟基萘(>98%,BR) 1,3-Dihydroxynaphthalene 132-86-5 质量规格：>98%,BR
芝麻素(标准品) Sesamin 607-80-7 质量规格：HPLC≥98%,标准品
三氧化钼(>98%,BR) Molybdic oxide 1313-27-5 质量规格：>98%,BR
细胞半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
蝙蝠葛诺林碱(标准品) Daurinoline 2831-75-6 质量规格：HPLC≥98%，标准品
3-碘-L-酪氨酸 3-Iodo-L-tyrosine 70-78-0 质量规格：>98%,BR
基质金属蛋白酶（MMP）胶原蛋白酶谱法（collagen-zymography）电泳分析试剂盒（MMP1/13） 进口/国产 规格：5次
细胞微管分离试剂盒 进口/国产 规格：10次
磷酸苯丙哌啉（标准品） Benproperine phosphate 19428-14-9 质量规格：含量测定
游离脂肪酸化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次
通用型柑桔枯萎病苟养木杆（Xylella fastidiosa；Xf）基因检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
细胞II型L－3羟酰基－CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶（HADHII/ABAD）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
真/酵母细胞染色质沉淀分析（CHIP）完全试剂盒（包括抗体） 进口/国产 规格：10次
丹磺酰氯(>98.0%(T)) Dabsyl Chloride 56512-49-3 质量规格：>98.0%(T)
肉毒杆菌A/B型（CB-A/B）PCR检测试剂盒Goat Anti-human IgM/Cy5 Cy5标记的羊抗人IgM 规格: 0.1ml
EDG1/CD363/S1P1 内皮细胞分化鞘脂G蛋白偶联受体1抗体 规格: 0.2ml
IL-17B 白介素-17B抗体 规格: 0.1ml
Sprouty1 软脂酰化磷蛋白Sprouty1抗体 规格: 0.1ml
EHHADH 三羟酰辅酶A脱酶抗体 规格: 0.2ml
GIMAP5 GTP酶IMAP家族成员5抗体 规格: 0.2ml
JIP1/MAPK8IP1 丝裂原活化蛋白激酶8相互作用蛋白1 规格: 0.2ml
CCDC7 卷曲螺旋结构域蛋白7抗体 规格: 0.2ml
Neurotensin/NTS 神经紧张素抗体 规格: 0.1ml
GLUT12 葡萄糖转运蛋白12抗体 规格: 0.2ml
IL-17 白介素-17抗体 规格: 0.1ml
MAG1 肺转移相关蛋白抗体 规格: 0.2ml
PDE5A 磷酸二酯酶5A抗体 规格: 0.2ml
SPP24/SPP2 分泌性磷蛋白24抗体 规格: 0.2ml
AP2 alpha 转录激活蛋白2α抗体 规格: 0.1ml
RUNX1T1/ETO 周期素D相关蛋白抗体 规格: 0.1ml
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