非洲猪瘟病毒LAMPPCR检测试剂盒

产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：非洲猪瘟病毒LAMPPCR检测试剂盒
产品规格：48T
产品货号：FS-P64268
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）

酮色林,凯他色林(标准品) Ketanserin 74050-98-9 质量规格：HPLC>98%,标准品

 载玻片细胞VEGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

细胞脂质尼罗红染色试剂盒 进口/国产 规格：50次

稻麦α淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒  进口/国产 规格：20次

大量蛋白样品液相法去内试剂盒 进口/国产 规格：5次

维生素K1 2,3-环氧化物 Vitamin K1 2,3-Epoxide 25486-55-9 质量规格：美国进口

地美溴胺 Demecarium Bromide  56-94-0 质量规格：>99%,BR

 组蛋白H3-T3磷酸化检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次等

噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 78587-05-0 质量规格：10μg/ml,u=6%

甲磺酸罗哌卡因（标准品） Ropivacaine mesylate 854056-07-8 质量规格：HPLC>98%,标准品

细胞乙醇脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

棕矢车菊素（标准品） 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone 18085-97-7 质量规格：HPLC≥98%，标准品

体液基质金属蛋白酶（MMP-2）活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

6α,3'-对二羟基紫杉醇 6α,3'-p-Dihydroxy Paclitaxel 157230-10-9 质量规格：美国进口

P35蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格：25次

肝素钠血液抗凝液 进口/国产 规格：100毫升

非洲猪瘟病毒LAMPPCR检测试剂盒PDC6I/Alix  调亡诱导因子6相互作用蛋白/多巴胺受体相互作用蛋白4抗体 规格: 0.2ml

CDKN1C/p57 Kip2  周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体 规格: 0.1mlMrpL39  线粒体核糖体蛋白L39 规格: 0.1ml

Nav1.5/SCN5A  电压门控钠通道5α抗体 规格: 0.2mlInvolucrin  囊包蛋白/内披蛋白抗体 0.2ml

CCL17/ABCD2  胸活化调节趋化因子抗体 规格: 0.1mlPI3 Kinase p110 beta  磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体 规格: 0.1ml

PDGFRA  小板源性生因子受体A抗体(PDGFRα) 规格: 0.1mlPhospho-MYPT1(Thr696)  磷酸化肌球蛋酸酶抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/Cy3  Cy3标记的兔抗马IgG 规格: 0.1mlCYP2C9  细胞色素P450 2C9抗体 规格: 0.1ml

Rarres3/TIG3  视黄酸受体应答蛋白3抗体 规格: 0.1mlNR2D/NMDAR2D  谷氨酸受体2D抗体 规格: 0.1ml

MLH1/hMLH 1  错配修复蛋白1抗体 规格: 0.1mlPhospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗体 规格: 0.1ml

HAX1  造干细胞特异性相关结合蛋白1抗体 规格: 0.2mlIumbrokinase  蚓激酶抗体 规格: 0.1ml

HES1  转录因子HES-1抗体 0.2mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗人IgG F(ab')2  规格: 0.1ml

phospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗体 规格: 0.1mlSox2  胚胎干细胞关键蛋白抗体 规格: 0.1ml

Pregnancy zone protein  娠区带蛋白PZP抗体 规格: 0.2mlIL-20R alpha/IL20RA  白介素20受体α链抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlIDH2  草酰琥珀酸脱羧酶抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC  FITC标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.3mlNCC27/CLIC1  氯离子通道蛋白27抗体 规格: 0.1ml

MACC1  结肠转移相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlPhospho-BMX/ETK (Tyr40)  磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体 规格: 0.1ml

Brk/PTK6  酪氨酸蛋白激酶6(瘤激酶) 规格: 0.2mlDRG1  GTP发育调控结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml

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