操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
服务:所有的检测试剂盒均免费代测,您只需要将您准备好的样本邮寄到我司即可!本地也可以上门收取样本!全程检测试剂盒实验技术指导,免费代做实验。本公司产品仅用于科研实验。老客户可享受优惠折扣服务!
产品名称
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解整合素样金属蛋白酶9试剂盒
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货号
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96T/48T
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货号
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FS-021466
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产品名称:解整合素样金属蛋白酶9试剂盒
货号:FS-021466
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
HCG alpha 英文名称:人绒毛膜促性α亚基/hCG α 抗体 规格: 0.1ml
HuC 英文名称:副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体 规格: 0.1ml
His tag(CT) 英文名称:聚组氨酸抗体g标签抗体(C端) 规格: 0.1ml
HSD11B2 英文名称:羟基类固醇脱氢酶11β2抗体 规格: 0.1ml
phospho-HDAC5 (Ser498) 英文名称:磷酸化组蛋白去乙酰化酶5抗体 规格: 0.1ml
HAGHL 英文名称:羟基酰谷胱甘肽水解酶样蛋白抗体 规格: 0.2ml
IKAP 英文名称:IKK复合物相关蛋白抗体 规格: 0.1ml
IL-2 英文名称:白介素2抗体(人) 规格: 0.1ml
IFITM1 英文名称:干扰素诱导跨膜蛋白1抗体 规格: 0.1ml
Insig1 英文名称:胰岛素诱导基因1抗体 规格: 0.2ml
IGF1R 英文名称:胰岛素样生长因子I受体抗体 规格: 0.1ml
IGFBP6 英文名称:胰岛素样生长因子结合蛋白6抗体 规格: 0.2ml
解整合素样金属蛋白酶9试剂盒通用试剂 2',7'-二氯荧光素 2',7'-Dichlorofluorescein,90% 76-54-0 1G
通用试剂 鹰嘴豆芽素A标准品 Biochanin A,98% 491-80-5 50MG
通用试剂 羟丙基纤维素 Hydroxypropyl cellulose,Mw ~100,000 9004-64-2 25G
通用试剂 维生素D2 Ergocalciferol,≥98.0% 50-14-6 1G
通用试剂 (+)-γ-维生素E (+)-γ-Tocopherol,≥96% 54-28-4 10MG
通用试剂 高良姜素 Galangin 548-83-4 25MG
通用试剂 醋酸纤维素 Cellulose acetate 9004-35-7 250G
通用试剂 L-甲状腺素 L-Thyroxine,≥98% 51-48-9 500MG
通用试剂 班蝥素 Cantharidin,98% 56-25-7 25MG
通用试剂 叶绿素B Chlorophyll B (HPLC,95%) 519-62-0 1MG
通用试剂 盐酸去氧肾上腺素 (R)-(?)-Phenylephrine hydrochloride,99% 61-76-7 5G
通用试剂 醋酸维生素A Retinyl acetate,USP/EP 127-47-9 1G
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