操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
服务：所有的检测试剂盒均免费代测，您只需要将您准备好的样本邮寄到我司即可！本地也可以上门收取样本！全程检测试剂盒实验技术指导，免费代做实验。本公司产品仅用于科研实验。老客户可享受优惠折扣服务！
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产品名称
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骨桥素试剂盒
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货号
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96T/48T
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货号
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FS-016160
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产品名称：骨桥素试剂盒
货号：FS-016160
规格：96T/48T
保存；2-8℃。
检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
试剂和样本的控制方法：
一、试剂
1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照国家标准进行生产，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的生产批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；
类风湿因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；
③检测抗原时，可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ��� 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准
PLGF (Placenta growth factor fragment)(human)人胎盘生长因子（多肽抗原） 0.5mg
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142))磷酸化β-连环蛋白抗原 0.5mg
CDK7/Cyclin H/MAT1周期素依赖性激酶7抗原 0.5mg
DRD4 receptor peptide多巴胺受体-D4抗原 0.5mg
FGF5 peptide纤维母细胞生长因子5抗原 0.5mg
HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P)人类疱疹病毒8抗原 0.5mg
Integrin AlphaE2/CD103整合素αE2抗原 0.2ml
MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)多药耐药相关蛋白2 0.5mg
PAK7/PAK5/MBT激活激酶PAK7/PAK5抗原 0.5mg
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor)新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗原 0.5mg
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein)肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗原 0.5mg
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2)毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2（抗原） 0.5mg
骨桥素试剂盒通用试剂 2-甲胺基-4-甲氧基-... 2-Methoxy-4-methyl-6-(methylamino)-1,3... 5248-39-5 5G
通用试剂 5H-5-甲基-6,7-二氢... 5H-5-Methyl-6,7-dihydrocyclopentapyraz... 23747-48-0 1G
通用试剂 1,4-二氯酞嗪 1,4-Dichlorophthalazine, ≥95.0% 1041953 1G
通用试剂 2-氨基-4-甲氧基-6-... 2-Amino-4-methoxy-6-methyl-1,3,5-triaz... 1668-54-8 5G
通用试剂 2,3,5,6-四甲基吡嗪 2,3,5,6-Tetramethylpyrazine 1124-11-4 25G
通用试剂 2-乙酰基吡嗪 2-Acetylpyrazine,≥99.0 % 22047-25-2 250G
通用试剂 2-乙酰基-3-甲基吡嗪 2-Acetyl-3-methylpyrazine 23787-80-6 5G
通用试剂 1-乙酰基-4-(4-羟基... 1-Acetyl-4-(4-hydroxyphenyl)piperazine... 67914-60-7 25G
通用试剂 盐酸甲苯噻嗪 Xylazine hydrochloride, ≥98.0% 23076-35-9 1G
通用试剂 1-(4,4'-二氟苯甲基... 1-Bis(4-fluorophenyl)methyl piperazine... 27469-60-9 1G
通用试剂 氨基吡嗪 Aminopyrazine,≥99.0% 5049-61-6 5G
通用试剂 1-苄基哌嗪 1-Benzylpiperazine 2759-28-6 25G
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