操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
服务:所有的检测试剂盒均免费代测,您只需要将您准备好的样本邮寄到我司即可!本地也可以上门收取样本!全程检测试剂盒实验技术指导,免费代做实验。本公司产品仅用于科研实验。老客户可享受优惠折扣服务!
产品名称
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可溶性转铁蛋白受体试剂盒
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货号
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96T/48T
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货号
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FS-016272
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产品名称:可溶性转铁蛋白受体试剂盒
货号:FS-016272
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
Amphiregulin 英文名称:双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体 规格: 0.1ml
ACF1 英文名称:溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体 规格: 0.2ml
Apg12 英文名称:自噬相关蛋白12抗体 规格: 0.2ml
ATG9A 英文名称:自噬相关蛋白9A抗体 规格: 0.2ml
ACTHR 英文名称:促肾上皮质受体 规格: 0.1ml
Acinus 英文名称:Acinus抗体 规格: 0.2ml
AP2 alpha + beta 英文名称:转录因子AP2α+β抗体 规格: 0.2ml
phospho-ATG16A(Ser213) 英文名称:磷酸化自噬相关蛋白16A抗体 规格: 0.1ml
ALS2CR1 英文名称:肌萎缩侧索硬化症相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
ATP4B 英文名称:氢钾ATP酶通道蛋白抗体 规格: 0.1ml
BNP 英文名称:脑钠素/利钠肽抗体 规格: 0.2ml
Bcl3 英文名称:B细胞瘤蛋白3抗体 规格: 0.1ml
可溶性转铁蛋白受体试剂盒通用试剂 间苯二甲酸单甲酯 Methyl Hydrogen Isophthalate,97% 1877-71-0 1G
通用试剂 6-甲基烟酸甲酯 6-Methylnicotinic Acid Methyl Ester 5470-70-2 1G
通用试剂 乙醇酸甲酯 Methyl glycolate,98% 96-35-5 5G
通用试剂 3-甲基吡唑-5-甲酸... Ethyl 3-Methylpyrazole-5-carboxylate,98% 4027-57-0 1G
通用试剂 4-硝基乙酯 4-Nitrophenylacetic Acid Ethyl Ester,99% 5445-26-1 5G
通用试剂 3-(二甲氨基)丙烯酸... 3-(Dimethylamino)acrylic Acid Ethyl Es... 924-99-2 10G
通用试剂 5-吲哚甲酸甲酯 Indole-5-carboxylic Acid Methyl Ester,... 1011-65-0 1G
通用试剂 5-尿嘧啶甲酸乙酯 5-Carbethoxyuracil,99% 28485-17-8 1G
通用试剂 (S)-(+)-扁桃酸甲酯 Methyl (S)-(+)-mandelate,≥99% 21210-43-5 1G
通用试剂 3-氨基-4-甲基苯甲... Methyl 3-Amino-4-methylbenzoate,≥98.0% 18595-18-1 5G
通用试剂 3-硝基-4-甲基苯甲... Methyl 4-Methyl-3-nitrobenzoate,99% 1993077 5G
通用试剂 2-溴苯甲酸乙酯 2-Bromobenzoic Acid Ethyl Ester,98% 4880 10G
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