ECP嗜酸性粒细胞阳离子蛋白ELISA试剂盒

注意事项:

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．  如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准

服务：所有的检测试剂盒均免费代测，您只需要将您准备好的样本邮寄到我司即可！本地也可以上门收取样本！全程检测试剂盒实验技术指导，免费代做实验。本公司产品仅用于科研实验。老客户可享受优惠折扣服务！

产品名称：ECP嗜酸性粒细胞阳离子蛋白ELISA试剂盒
英文名称：eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit

货号：A097588

规格：96T/48T 

保存；2-8℃。

检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.

检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。

实验流程:

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；

2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；

3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；

4. 洗板3次；

5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；

8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

试剂和样本的控制方法：

一、试剂

1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照国家标准进行生产，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的生产批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。

2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。

二、样本

1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；

类风湿因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；

③检测抗原时，可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。

检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。

8.  每孔加入100ul 终止液混匀。

9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

操作流程：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

Demethylwedelolactone Sulfate　1318240-80-0　5mg

Metronidazole Benzoate　13182-89-3　25mg

Metronidazole Benzoate　13182-89-3　10mM*1mLinDMSO

Metronidazole Benzoate　13182-89-3　50mg

Metronidazole Benzoate　13182-89-3　100mg

Metronidazole Benzoate　13182-89-3　250mg

H-Lys-Lys-OH　13184-13-9　1g

H-Lys-Lys-OH　13184-13-9　5g

H-Lys-Lys-Lys-OH　13184-14-0　50mg

H-Lys-Lys-Lys-OH　13184-14-0　250mg

Carbamoyl-Asp-OH . magnesium salt/Carbamoyl-Asp-OH . dipotassium salt (1:1)　13184-27-5　1g

Carbamoyl-Asp-OH . magnesium salt/Carbamoyl-Asp-OH . dipotassium salt (1:1)　13184-27-5　5g

Lexacalcitol　131875-08-6　1mg

Lexacalcitol　131875-08-6　5mg

Lexacalcitol　131875-08-6　10mg

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