培养步骤:
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品名称
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规格
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货号
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脾源性内皮祖细胞
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5×105
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FS-X019882
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产品名称:脾源性内皮祖细胞
产品规格:5×105
货号:BH-X019882
产品类型:原代细胞
单位:T25/瓶
提供细胞鉴定:提供**荧光鉴定报告
保存培养温度(℃):37
运输温度(℃):常温
细胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
![](//yt.yzimgs.com/ComFolder/200132342/image/202109/202109071414312911.jpg)
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
尿道定位显色培养基A 1000 mL/瓶
酪蛋白胨大豆胨琼脂USP(TSB)
Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真改性琼脂(氯化) 1.05414.0500MERCK默克
MRS agar Lactobacillus agar acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS 1.10660.0500MERCK默克
Selective agar for pathogenic fungi致病真选择琼脂 ows\system32\networkexplorer.dll
脾源性内皮祖细胞神经外营养蛋白2(NXPH2)elisa检测试剂盒英文名称:NXPH2 ELISA Kit,英文缩写:NXPH2,产品别名:神经外营养蛋白2(NXPH2)ELISA检测试剂盒,神经外营养蛋白2(NXPH2)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)elisa检测试剂盒英文名称:LPCAT4 ELISA Kit,英文缩写:LPCAT4,产品别名:溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)ELISA检测试剂盒,溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
上皮粘附分子(EPCAM)elisa检测试剂盒英文名称:EPCAM ELISA Kit,英文缩写:EPCAM,产品别名:上皮粘附分子(EPCAM)ELISA检测试剂盒,上皮粘附分子(EPCAM)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
全羧酶合成酶(HLCS)elisa检测试剂盒英文名称:HLCS ELISA Kit,英文缩写:HLCS,产品别名:全羧酶合成酶(HLCS)ELISA检测试剂盒,全羧酶合成酶(HLCS)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
亲核素α4(KPNα4)elisa检测试剂盒英文名称:KPNα4 ELISA Kit,英文缩写:KPNα4,产品别名:亲核素α4(KPNα4)ELISA检测试剂盒,亲核素α4(KPNα4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
前庭蛋白1(VEST1)elisa检测试剂盒英文名称:VEST1 ELISA Kit,英文缩写:VEST1,产品别名:前庭蛋白1(VEST1)ELISA检测试剂盒,前庭蛋白1(VEST1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
葡萄糖转运蛋白10(GLUT10)elisa检测试剂盒英文名称:GLUT10 ELISA Kit,英文缩写:GLUT10,产品别名:葡萄糖转运蛋白10(GLUT10)ELISA检测试剂盒,葡萄糖转运蛋白10(GLUT10)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
配对框基因9(PAX9)elisa检测试剂盒英文名称:PAX9 ELISA Kit,英文缩写:PAX9,产品别名:配对框基因9(PAX9)ELISA检测试剂盒,配对框基因9(PAX9)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
尿卟啉原脱羧酶(UROD)elisa检测试剂盒英文名称:UROD ELISA Kit,英文缩写:UROD,产品别名:尿卟啉原脱羧酶(UROD)ELISA检测试剂盒,尿卟啉原脱羧酶(UROD)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
脑膜瘤基因1(MN1)elisa检测试剂盒英文名称:MN1 ELISA Kit,英文缩写:MN1,产品别名:脑膜瘤基因1(MN1)ELISA检测试剂盒,脑膜瘤基因1(MN1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
膜联蛋白A5(ANXA5)elisa检测试剂盒英文名称:ANXA5 ELISA Kit,英文缩写:ANXA5,产品别名:膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA检测试剂盒,膜联蛋白A5(ANXA5)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
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