操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。本公司仅用于科研实验。
产品名称
|
规格
|
货号
|
原代平滑肌细胞培养体系
|
100ml/500ml
|
FS-X019948
|
产品名称:原代平滑肌细胞培养体系
产品规格:100ml/500ml
货号:BH-X019948
保存温度(℃):2-8℃/-20℃
运输温度(℃):2-8℃/-20℃
细胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。
培养步骤:
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
![](https://img77.hbzhan.com/9/20211109/637720524698462966213.jpg)
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
叶酸测定培养基 100(g)
AC肉汤 250(g)
Campy-Cefex琼脂基础 100(g)
MIO培养基 100(g)
精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS) 100(g)
酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD) 250(g)
MH琼脂(MHA) 250(g)
原代平滑肌细胞培养体系葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)elisa检测试剂盒英文名称:GLUT3 ELISA Kit,英文缩写:GLUT3,产品别名:葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA检测试剂盒,葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
鸟氨酸脱羧酶(ODC)elisa检测试剂盒英文名称:ODC ELISA Kit,英文缩写:ODC,产品别名:鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA检测试剂盒,鸟氨酸脱羧酶(ODC)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)elisa检测试剂盒英文名称:FⅩⅢ ELISA Kit,英文缩写:FⅩⅢ,产品别名:凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA检测试剂盒,凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa检测试剂盒英文名称:ANX-Ⅴ ELISA Kit,英文缩写:ANX-Ⅴ,产品别名:膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA检测试剂盒,膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)elisa检测试剂盒英文名称:Gliadin-IgA ELISA Kit,英文缩写:Gliadin-IgA,产品别名:麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA检测试剂盒,麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
磷酸葡萄糖变位酶(PGM)elisa检测试剂盒英文名称:PGM ELISA Kit,英文缩写:PGM,产品别名:磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA检测试剂盒,磷酸葡萄糖变位酶(PGM)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
类风湿因子(RF)elisa检测试剂盒英文名称:RF ELISA Kit,英文缩写:RF,产品别名:类风湿因子(RF)ELISA检测试剂盒,类风湿因子(RF)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)elisa检测试剂盒英文名称:sRANKL ELISA Kit,英文缩写:sRANKL,产品别名:可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA检测试剂盒,可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)elisa检测试剂盒英文名称:SCL70/topoⅠ ELISA Kit,英文缩写:SCL70/topoⅠ,产品别名:人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)ELISA检测试剂盒,人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
人抗人绒毛膜促性腺抗体(AhCGAb)elisa检测试剂盒英文名称:AhCGAb ELISA Kit,英文缩写:AhCGAb,产品别名:人抗人绒毛膜促性腺抗体(AhCGAb)ELISA检测试剂盒,人抗人绒毛膜促性腺抗体(AhCGAb)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
人抗黄体**素抗体(Anti LH Ab)elisa检测试剂盒英文名称:Anti LH Ab ELISA Kit,英文缩写:Anti LH Ab,产品别名:人抗黄体**素抗体(Anti LH Ab)ELISA检测试剂盒,人抗黄体**素抗体(Anti LH Ab)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报