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产品名称
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规格
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货号
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原代少突胶质细胞培养体系
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100ml/500ml
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FS-X019950
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产品名称:原代少突胶质细胞培养体系
产品规格:100ml/500ml
货号:BH-X019950
保存温度(℃):2-8℃/-20℃
运输温度(℃):2-8℃/-20℃
细胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。
培养步骤:
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
![](https://img77.hbzhan.com/9/20211109/637720524698462966213.jpg)
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
青霉素-链霉素-新霉素(100X)
PSN antibiotic mixture 每毫升合剂含5mg青霉素、5mg链霉素和10mg新霉素,保存:-5 - -20°15640-055
CTX-M显色培养基 用于新型超广谱β内酰胺酶(ESBL)产生CTX-M型的分离和鉴定1000ml
琼脂片剂 (3号琼脂)(CM0049) Oxoid
亮绿琼脂 (Kauffmann 培养基) (CM0263) Oxoid
虎红氯霉素琼脂基础 (CM0549) Oxoid
碱性胆盐琼脂
原代少突胶质细胞培养体系cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)elisa检测试剂盒英文名称:PRKG1 ELISA Kit,英文缩写:PRKG1,产品别名:cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)ELISA检测试剂盒,cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
APEX核酸酶1(APEX1)elisa检测试剂盒英文名称:APEX1 ELISA Kit,英文缩写:APEX1,产品别名:APEX核酸酶1(APEX1)ELISA检测试剂盒,APEX核酸酶1(APEX1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
B-趋化因子1(BLC1)elisa检测试剂盒英文名称:BLC1 ELISA Kit,英文缩写:BLC1,产品别名:B-趋化因子1(BLC1)ELISA检测试剂盒,B-趋化因子1(BLC1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
ⅩⅤ型胶原(COL15)elisa检测试剂盒英文名称:COL15 ELISA Kit,英文缩写:COL15,产品别名:ⅩⅤ型胶原(COL15)ELISA检测试剂盒,ⅩⅤ型胶原(COL15)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(OGG1)elisa检测试剂盒英文名称:OGG1 ELISA Kit,英文缩写:OGG1,产品别名:8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(OGG1)ELISA检测试剂盒,8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(OGG1)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
205kDa核孔蛋白(NUP205)elisa检测试剂盒英文名称:NUP205 ELISA Kit,英文缩写:NUP205,产品别名:205kDa核孔蛋白(NUP205)ELISA检测试剂盒,205kDa核孔蛋白(NUP205)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
组织蛋白酶D(cath-D)elisa检测试剂盒英文名称:cath-D ELISA Kit,英文缩写:cath-D,产品别名:组织蛋白酶D(cath-D)ELISA检测试剂盒,组织蛋白酶D(cath-D)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
周期素依赖性激酶4(CDK-4)elisa检测试剂盒英文名称:CDK-4 ELISA Kit,英文缩写:CDK-4,产品别名:周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA检测试剂盒,周期素依赖性激酶4(CDK-4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
中性粒防御素1-3(HNP1-3)elisa检测试剂盒英文名称:HNP1-3 ELISA Kit,英文缩写:HNP1-3,产品别名:中性粒防御素1-3(HNP1-3)ELISA检测试剂盒,中性粒防御素1-3(HNP1-3)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
张力蛋白4(TNS4)elisa检测试剂盒英文名称:TNS4 ELISA Kit,英文缩写:TNS4,产品别名:张力蛋白4(TNS4)ELISA检测试剂盒,张力蛋白4(TNS4)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
游离血红蛋白(f-Hb)elisa检测试剂盒英文名称:f-Hb ELISA Kit,英文缩写:f-Hb,产品别名:游离血红蛋白(f-Hb)ELISA检测试剂盒,游离血红蛋白(f-Hb)检测试剂盒产品保存:2~8℃、有效期6个月。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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