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产品资料

原代肾系膜细胞培养体系

原代肾系膜细胞培养体系
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  • 产品名称:原代肾系膜细胞培养体系
  • 产品型号:FS-X019966
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
原代肾系膜细胞培养体系在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
产品描述

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。本公司仅用于科研实验

产品名称

规格

货号

原代肾系膜细胞培养体系

100ml/500ml

FS-X019966

 

产品名称:原代肾系膜细胞培养体系

产品规格:100ml/500ml

货号:BH-X019966

保存温度(℃):2-8℃/-20℃

运输温度(℃):2-8℃/-20℃

细胞培养操作规程:

主要功能:

(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。

(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。

(3)与血管的进展和稳定有关。

 生理变化:

(1)主动脉硬化。

(2)主动脉瘤

(3)主动脉钙化。

基本特性:

(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。

(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色。

(3)原代细胞培养末期液氮冻存。

(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。

(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色验证。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。



培养步骤:

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


细胞培养操作规程:

 

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

肌醇测定培养基    100(g)

m-TEC琼脂    250(g)

改良克氏双糖铁琼脂    250(g)

改良MSRV培养基    250(g)

氨苄青霉素麦康凯琼脂基础    250(g)

检定培养基2号(pH 7.9±0.1)    250(g)

血液琼脂基础    250(g)

原代肾系膜细胞培养体系颗粒体蛋白(GRN)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforGranulin(GRN)  规格:48T/96T  进口、国产

分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforSecretograninIII(SCG3)  规格:48T/96T  进口、国产

N-乙酰转移酶8(NAT8)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforN-Acetyltransferase8(NAT8)  规格:48T/96T  进口、国产

Apelin12蛋白(AP12)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforApelin12(AP12)  规格:48T/96T  进口、国产

突触囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforSynaptotagminI(SYT1)  规格:48T/96T  进口、国产

甲状腺球蛋白(TG)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforThyroglobulin(TG)  规格:48T/96T  进口、国产

N-myc下游调节基因2(NDRG2)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforN-mycDownstreamRegulatedGene2(NDRG2)  规格:48T/96T  进口、国产

24-脱氢胆固醇还原酶(DHCR24)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitfor24-DehydrocholesterolReductase(DHCR24)  规格:48T/96T  进口、国产

间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforIntercellularAdhesionMolecule1(ICAM1)  规格:48T/96T  进口、国产

角蛋白17(KRT17)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforKeratin17(KRT17)  规格:48T/96T  进口、国产

 


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