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产品资料

原代雪旺细胞培养体系

原代雪旺细胞培养体系
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:原代雪旺细胞培养体系
  • 产品型号:FS-X019961
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
原代雪旺细胞培养体系采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品描述

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。

 

产品名称

原代雪旺细胞培养体系

规格

100ml/500ml

货号

FS-X019961

 

产品名称:原代雪旺细胞培养体系

产品规格:100ml/500ml

货号:BH-X019961

保存温度(℃):2-8℃/-20℃

运输温度(℃):2-8℃/-20℃

培养操作步骤 :

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 

2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理; 

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

细胞处理方法:

以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导,请及时电话或邮件联系。

一.贴壁细胞

客户接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。

肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。

显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。

严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。

1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2  培养。

二.悬浮细胞

1. 接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。

2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。

3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。

5. 1000rpm,5min离心,重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2  培养。

APT agar APT琼脂    1.10453.0500MERCK默克

CT-supplement CT吡啶剂    1.09202.0001MERCK默克

AgarLactose TTC with Tergitol( base) 乳糖TTC琼脂    1.07680.0500MERCK默克

OGYE Agar Oxytetracycline-Glucose-Yeast Ectract Agar Base    1.05978.0500MERCK默克

Standard 11 nutrient agar

原代雪旺细胞培养体系脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforDeoxyribonucleaseI(DNASE1)  规格:48T/96T  进口、国产

封闭蛋白8(CLDN8)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforClaudin8(CLDN8)  规格:48T/96T  进口、国产

血管活性肠肽(VIP)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforVasoactiveIntestinalPeptide(VIP)  规格:48T/96T  进口、国产

硝基酪氨酸(NT)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforNitrotyrosine(NT)  规格:48T/96T  进口、国产

苯酚磺基转移酶(PST)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforPhenolSulfotransferase(PST)  规格:48T/96T  进口、国产

心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforAtrialNatriureticPeptide(ANP)  规格:48T/96T  进口、国产

激肽释放酶结合蛋白(KAL)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforKallistatin(KAL)  规格:48T/96T  进口、国产

血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforAngiotensinII(AngII)  规格:48T/96T  进口、国产

白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforInterleukin6(IL6)  规格:48T/96T  进口、国产

酪氨酸羟化酶(TH)检测试剂盒(酶联吸附试验法)  ELISAKitforTyrosineHydroxylase(TH)  规格:48T/96T  进口、国产

 


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