细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 L6大鼠成肌细胞 英文名称 L6:L6 产品货号 A01X1136 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 成肌细胞样 产品种属 大鼠 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 骨胳肌;成肌细胞 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
L6大鼠成肌细胞
英文名称
L6:L6
产品货号
A01X1136
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
成肌细胞样
产品种属
大鼠
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
骨胳肌;成肌细胞
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成肌细胞样
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
温度:液氮
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 L6成肌细胞是由Yaffe从甲基胆蒽存在下大鼠大腿肌的原代培养物初两代中分离得到。L6细胞在培养基中可融合形成多核的肌管和横纹肌纤维。L6细胞融合的程度随着代数的增加而下降;因而,L6细胞应冷冻于低代次阶段并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。如果让培养容器中的细胞长满,L6细胞的成肌组分将迅速耗尽。
组织来源 骨胳肌;成肌细胞
细胞类型 转化细胞系
生物等级 1
基因表达情况 myosin
保藏机构 ATCC; CRL-1458 BCRJ; 0141
巴尔得-别德尔综合征相关蛋白12抗体 BBS12 斑联蛋白抗体 Zyxin
CD299抗体 CD299 CoREST2蛋白抗体 CoREST2
线粒体核糖体蛋白S26抗体 MRPS26 小脑肽1抗体 CBLN1
周期素依赖性激酶5单克隆抗体 CDK5 转录源蛋白质CUX2抗体 Cux2
MOGAT3蛋白抗体 MOGAT3 NDUFS2抗体 NDUFS2
磷酸化3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 Phospho-PDK1 (Ser241) 磷酸化SH3结构域结合蛋白2抗体 phospho-SH3BP2 (Ser427)
谷氧还蛋白5抗体 Glutaredoxin 5 含patatin样磷脂酶6抗体 PNPLA6/NTE
溶质载体家族25成员43抗体 SLC25A43 神经细胞NB3特定蛋白抗体 Contactin 6大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa检测试剂盒 细胞BAX蛋白表达比色法定量检测试剂盒
1号染色体开放阅读框186抗体 C1orf186
Ral鸟苷酸酶活性分析试剂盒 小鼠EGF样域蛋白7(EGFL7)elisa检测试剂盒
小鼠细胞功能关联抗原2(LFA2)elisa检测试剂盒 大鼠非转移细胞1表达NM23A蛋白(NME1)elisa检测试剂盒
乌头酸酶(aconitase)活性荧光定量检测试剂盒 人蛋白水解诱导因子/皮离蛋白(PIF/DCD)elisa检测试剂盒
即用型LB液体培养基Amp+ 60VIA 通用型HRP复合物稳定/稀释溶液
L6大鼠成肌细胞小鼠凋亡诱导因子(AIF)elisa检测试剂盒 大鼠Rho鸟苷酸交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)elisa分析检测试剂盒
白细胞介素27抗体 IL27
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。