细胞培养操作：
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
|
产品名称
|
MDCK狗肾转化细胞
|
英文名称
|
MDCK:MDCK
|
|
产品货号
|
A01X1179
|
培养条件
|
气相：空气，95%；CO2，5%,
|
|
生长特性
|
贴壁细胞
|
细胞形态
|
上皮细胞样
|
|
产品种属
|
狗
|
冻存条件
|
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
|
|
组织来源
|
肾
|
用途
|
仅供科研研究实验
|
商品详情：
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 MDCK(NBL-2)细胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1958年9月从一只外观正常的成年雌性英国小猎犬的肾分离得到的；MDCK(NBL-2)细胞角蛋白过氧化物酶染色呈阳性；MDCK(NBL-2)细胞被用于研究β-粥样蛋白前体的处理及其蛋白水解产物。
年龄（性别） 雌性；成年
组织来源 肾
细胞类型 自发永生化细胞
生物等级 BSL-1
基因表达情况 The cells are positive for
keratin by immunoperoxidase staining.
保藏机构 ATCC; CCL-34 ATCC;
CRL-6253ECACC; 84121903 ECACC; 85011435
公司正在出售的产品：
RNF131 补体因子H相关蛋白4抗体
钾离子通道蛋白家族成员4抗体 KCNE4
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T 环指蛋白131抗体
大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)elisa检测试剂盒 载玻片细胞TNF ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
磷酸化神经生长相关蛋白SCG10抗体 Anti-phospho-STMN2/SCG10
(Ser50) 血小板白细胞C激酶底物同源结构域M2抗体 Anti-PLEKHM2/SKIP
真核翻译起始因子2C4抗体 Argonaute 4
小鼠opiorphin elisa生化检测试剂盒 CFHL4
泛酸激酶3抗体 Anti-PANK3 泛素化组蛋白H2AX抗体 Anti-Histone H2A.X
(Ubiquityl Lys119)锌指蛋白ZIC5抗体 ZIC5
猫促甲状腺素(TSH)elisa生化检测试剂盒 石蜡切片皮尔斯（PERLS-DAB）非血红素铁（三价）
胶体金标记的兔抗小鼠IgG H&L Rabbit Anti-Mouse IgG H&L / Gold
绵羊弹性蛋白酶2,中性粒细胞(ELA2)elisa生化检测试剂盒 neutrophil(ELA2)ELISA kit
小鼠的牛血清白蛋白残留检测elisa生化检测试剂盒 Mouserudimentalbovineserumalbumincheck-upELISAKit
甲型流感H5N1(Avian Flu)HA elisa生化检测试剂盒 Influenza A H5N1(Avian
Flu)HA ELISA Kit
MDCK狗肾转化细胞人弹性蛋白酶(Elastase)elisa生化检测试剂盒 HumanElastaseELISAKit
RNA纯化试剂盒 20次 小鼠基质γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)elisa检测试剂盒免费代测
细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报