NRK-52E大鼠肾细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

生长培养基 DMEM＋5% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

组织来源 正常肾

细胞类型 自发永生化细胞

生物等级 1

倍增时间 ~45 hours

受体表达情况 epidermal growth factor (EGF); multiplication stimulating activity (MSA)

保藏机构 ATCC; CRL-1571 DSMZ; ACC-199 ECACC; 87012902

SPOPL       酪蛋白激酶δ1抗体

萤火虫荧光素酶抗体       Luciferase

透明带黏附蛋白ZAN抗体  Anti-ZAN       SPOPL蛋白抗体

神经突触相关蛋白SLITRK4抗体  Anti-SLITRK4       垂体瘤细胞凋亡抗体  Anti-RHBDD3

染色体特异性转录延伸因子抗体  Anti-SUPT16H/CDC68       肌肉糖原磷酸化酶抗体  Anti-PYGM

10号染色体开放阅读框30抗体       C10orf30

钠离子/氢离子交换蛋白3抗体  Anti-NHE3/Sodium/hydrogen exchanger 3      CSNK1D

磷脂酰肌醇激酶抗体  Anti-PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit       辣椒素受体抗体  Anti-TRPV1/VR1雌二醇单克隆抗体       alpha Estradiol

人IV形胶原蛋白α3链(COL4A3)elisa检测试剂盒免费代测       组织PAK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

Cy3标记鸡IgM       Chicken IgM / Cy3

大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)elisa生化检测试剂盒       MIP-5 ELISA Kit

小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)elisa生化检测试剂盒       MouseE-SelectinELISAkit

核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)elisa生化检测试剂盒       NDPK-A ELISA kit

NRK-52E大鼠肾细胞人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)elisa生化检测试剂盒       Pro-IL-1βELISAKit

大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa生化检测试剂盒       小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)elisa检测试剂盒

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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