狗肾细胞；Super Tube

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

生长培养基 DMEM/F12＋0.05mM NEAA＋10% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

背景描述 从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK，从中克隆建立了狗上皮样细胞株Super Tube细胞。当维持高细胞浓度时，Super Tube细胞形成大量的小管(据报道，24孔板的每孔铺7×10^5细胞，3天内就能形成小管)。要形成小管，Super Tube细胞需要每天两次换液以提供足够养分。与原始细胞株相比，Super Tube细胞的c-AMP的检测水平低得多，在毛喉su刺激下读出的腺苷环化酶水平也低；Super Tube细胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。

年龄（性别） 雌；成年

组织来源 正常肾

细胞类型 自发永生化细胞

生物等级 1

保藏机构 ATCC; CRL-2285

MCC       DIM-7蛋白抗体

DIM-7       正苯基萘胺摄入法膜损伤荧光检测试剂盒

通用型李属坏死环斑病毒（Prunus Necrotic Ringspot Virus；PNRSV）       大肠癌肿瘤突变蛋白抗体

细胞脂质过氧化物亚油酸（linoleic acid）细胞流式分析试剂盒       PCID1蛋白抗体

Homeo box C10       TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体  Anti-TNIK

豚鼠乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)elisa分析检测试剂盒       大鼠肾素(Renin)elisa检测试剂盒

PCID1      源盒蛋白C10抗体

脑特异性多肽蛋白19抗体  Anti-PCP4/PEP-19       孤儿核受体PAR1抗体  Anti-PXRRabbit Anti-Horse IgG H&L / PE-Cy5.5       磷酸化原癌蛋白CBL2抗体

缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶4抗体       HIF Prolyl Hydroxylases

跨膜蛋白SEMA4A抗体  Anti-SEMA4A       PE-Cy5.5标记的兔抗马IgG H&L

phospho-CBL (Tyr731)       磷酸化ZCWCC1抗体  Anti-phospho-ZCWCC1 (Ser739)

利钠肽受体C抗体  Anti-NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C       磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体  Anti-Phospho-RSK2 (Ser227)

短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体  Anti-SCHAD/HADHSC       大鼠8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa分析检测试剂盒

狗肾细胞；Super Tube8-epi-PGF2α ELISA Kit       人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)elisa分析检测试剂盒

原钙粘附蛋白17抗体       PCDH17

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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