实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠睾丸支持细胞分离自睾丸；睾丸支持细胞又称Sertoli细胞，在体内呈不规则的高锥体形，细胞基部附着在基膜上，顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架，为其提供必需的营养物质，能合成与分泌雄**结合蛋白，为其提供高浓度的雄**环境等，还具有构成血-睾屏障，形成睾丸内微环境，调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞，能分泌多种生长因子和抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值，而且在精子发生等领域有重要意义。
组织来源
产品规格
货号
用途
睾丸组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1622
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠睾丸支持细胞经Fas-L荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
EMAbELISAKit
大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)elisa分析检测试剂盒
CXCR4 ELISA Kit
人高香草酸(HVA)elisa分析检测试剂盒
HVAELISAKit
小鼠核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族(肝脏,嗜酸性粒细胞源性神经)(RNASE2)elisa分析检测试剂盒
Annexin V-FITC / 7-AAD 双染细胞凋亡检测试剂盒20T
石蜡切片组织CASPASE-4蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
硫氧还蛋白过氧化物酶TPX测试盒 100T/48样 紫外比色法
组织相容性抗原DQB1抗体
HLA DQB1
胆汁酸盐输出泵重组兔单克隆抗体
ABCB11
大鼠(SS)elisa检测试剂盒
植物氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒
豚鼠环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测试剂盒
位素[γ32P]ATP激酶标记微卫星扩增试剂盒
PSD95相关紧密连接蛋白PATJ抗体
PATJ
肌钙集蛋白/收钙素抗体
Calsequestrin
转铁蛋白/血清铁传递蛋白抗体 Anti-Transferrin
神经丛蛋白A1抗体 Anti-Plexin A1
多聚腺苷酸结合蛋白抗体 Anti-PABP
跨膜蛋白SEMA5A抗体 Anti-SEMA5A/Semaphorin 5A
Cy7标记的小鼠抗羊IgG H&L
大鼠睾丸支持细胞Mouse Anti-Goat IgG H&L / Cy7
链激酶抗体
Autoantigen RO; CALR; CALR protein; CALR_HUMAN; cC1qR; CRP55; CRTC; Endoplasmic reticulum resident protein 60; ERp60; grp60; HACBP; RO; Sicca syndrome antigen A; SSA.
大鼠巩膜成纤维细胞
猪乳腺成纤维细胞
A875人黑色素瘤细胞
95-D人高转移肺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；