实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠颌下腺上皮细胞分离自颌下腺组织；颌下腺是下颌部的唾液腺，左右各一个。颌下腺属于唾液腺的一种，主要的功能就是分泌唾液。机体共有三大唾液腺，包括腮腺、颌下腺及舌下腺。颌下腺位于下颌骨的下方，接近下颌骨弯曲角附近，所以也叫下颌下腺（下颌骨下方的唾液腺），左右各一，由舌下舌系带两侧处伸出颌下腺排泄管，主要分泌黏液和浆液状性质的唾液。颌下腺上皮细胞是一种高度分化的上皮细胞，在体外难以长期存活和保持分化状态；颌下腺的主要病理变化有：①颌下腺炎；②颌下腺囊肿；③颌下腺肿；④颌下腺结石。
组织来源
产品规格
货号
用途
颌下腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1614
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠颌下腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠颌下腺上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
MouseAnti-CyclicCitrullinatedPeptideAntibody(Anti-CCP-antibody)ELISAkit
大鼠B细胞κ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa分析检测试剂盒
Rat NFKBIE ELISA Kit
人肝素-血小板因子4复合物抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
HumanHeparin-Plateletfactor4ComplexantibodyIgGELISAKit
转录因子相互作用蛋白1抗体 Anti-TTI1
c-Myc应答蛋白抗体 Anti-RCL/c Myc responsive
磷酸化谷氨酸受体1抗体 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897)
血管内皮生长因子受体2抗体 Anti-VEGFR2/FLK1
转录调节因子HOXD9抗体
HOXD9
细胞分裂周期蛋白5抗体
APC5
驴黄体**素(LH)elisa检测试剂盒免费代测
石蜡切片总舒尔茨间接染色试剂盒
小鼠环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
大鼠半乳糖凝集素7(GAL7)elisa检测试剂盒
原钙粘蛋白β7抗体
PCDHB7
艾滋病病毒Nef抗体
HIV1 Nef
磷酸化羟化酶抗体 Anti-Phospho-TH (Ser31)
丝裂原活化蛋白激酶p38α抗体 Anti-p38MAPK/MAPK14/p38Alpha
过氧化酶活化受体γ2抗体 Anti-PPAR gamma 2
突触相关蛋白29抗体 Anti-SNAP29
PE-CY5标记的小鼠抗豚鼠IgG H&L
大鼠颌下腺上皮细胞Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5
成纤维细胞生长因子11抗体
GRIK2+GRIK3; G protein coupled receptor family C group 1 member F; GLR 6; GLR6; GLUR 6; GluR-6; GLUR6; Glutamate receptor 6; Glutamate receptor; Glutamate receptor ionotropic kainate 2; Gprc 1f; Gprc1f; GRIK 2; GRIK2; GRIK2 protein; GRIK2_HUMAN; GRM 6; ionotropic kainate 2; EAA5; Excitatory amino acid receptor 5; GLR 7; GLR7; GLU R7; GLUR 7; GluR 7a; GluR-7; GLUR7; GluR7a; Glutamate receptor 7; Glutamate receptor; Glutamate receptor ionotropic kainate 3; GRIK 3; GRIK3; GRIK3_HUMAN; ionotropic kainate 3.
大鼠滑膜成纤维细胞
猪垂体细胞
BJ人皮肤成纤维细胞
A-431人表皮鳞状细胞癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；