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产品资料

大鼠滑膜成纤维细胞

大鼠滑膜成纤维细胞
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:大鼠滑膜成纤维细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
大鼠滑膜成纤维细胞公司正在出售的产品:LL/2细胞 20号染色体开放阅读框196抗体 gp130 ELISA Kit 糖蛋白检测试剂盒 组蛋白去乙酰化酶11抗体 人胚肾细胞; 293 c18 (STR)
产品描述
大鼠滑膜成纤维细胞

细胞简介:


大鼠滑膜成纤维细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A(巨噬样滑膜细胞)B(成纤维样滑膜细胞)以及C(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。

组织来源

产品规格

货号

用途

滑膜

5×105cells/T25细胞培养瓶

A01X1649

仅供科研研究实验

培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传3代左右

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

大鼠滑膜成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

方法简介

实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞采用混合酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

实验具体步骤:


(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,

利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)

(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头

镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);


(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;

(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。

根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;

(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。

实验方法:

一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。

公司正在出售的产品:


土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒

脂肪水解酶LIPN抗体

LIPN/Lipase N

CTAGE6蛋白抗体

CTAGE6

小鼠β-防御素1 elisa检测试剂盒

CO2结合力测试盒 2ml×3×10 滴定法

冰冻切片组织IL蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

尿素氮BUN测试盒 100/96样 脲酶法

核受体蛋白NR2E1抗体

NR2E1

糖原蛋白1抗体

GYG1

肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗体  Anti-TRAF3/CD40bp

甲状旁腺相关蛋白抗体  Anti-PTHrP/PTHLH

磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体  Anti-phospho-PIK3R2(Tyr467)

SARM1蛋白抗体  Anti-SARM1

磷酸化珠蛋白转录因子1抗体

phospho-GATA1 (Ser161)

嗅觉受体5F1抗体

OR5F1

乙型肝炎X蛋白反转录蛋白4抗体  Anti-XTP4

胞内活化的Notch1蛋白抗体  Anti-NOTCH1/activated Notch1

受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体  Anti-REEP5

钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体  Anti-SCN7A

大鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)elisa分析检测试剂盒

大鼠滑膜成纤维细胞α-GST ELISA Kit

人汉坦病毒(HV)抗体(IgM)elisa分析检测试剂盒

FMR2; AF4/FMR2 family member 2; AF4/FMR2 family, member 2; AFF2; AFF2_HUMAN; FMR2; FMR2P; Fragile X E mental retardation syndrome protein; fragile X mental retardation 2; Fragile X mental retardation 2 protein; fragile X mental retardation gene associated with FRAXE; FRAXE; mild or borderline mental retardation; MRX2; OX19; Protein FMR-2; Protein Ox19.

大鼠滑膜间充质干细胞

猪鼻腔粘膜上皮细胞

BT-474人乳腺导管癌细胞

A498人肾癌细胞


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