实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠破骨细胞分离自骨组织和骨髓；破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞，位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统，其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡，若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收，形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞，属于不增殖细胞群，不能增殖和传代，只能进行原代培养且存活时间较短。
组织来源
产品规格
货号
用途
骨髓
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1654
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 多核、巨细胞
传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠破骨细胞经TRAP染色检测，纯度可达30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
大鼠趋化因子(FK)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠β内啡肽受体(β-EPR)elisa检测试剂盒
小鼠亲环素B(CYPB)elisa检测试剂盒
人DNA损伤诱导转录因子4样蛋白(DDIT4/RTP801)elisa分析检测试剂盒
组织AURORA-C激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
大鼠孕酮受体(PROGR)elisa检测试剂盒免费代测
INSULIN R-ALPHA 蛋白共沉淀分析试剂盒
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa检测试剂盒
β-半乳糖苷酶（β-GAL）测试盒
热休克蛋白70蛋白4样蛋白抗体 HSPA4L
溶血磷脂酶样蛋白1抗体 LYPLAL1
IV型胶原α3结合蛋白抗体 COL4A3BP
KIAA1688蛋白抗体 KIAA1688
真核翻译起始因子3K抗体 eIF3K
植烷酸氧化酶抗体 PHYHIP
钙腔蛋白抗体 CALU
肝细胞源性纤维蛋白原相关蛋白1/FGL1抗体 HFREP1
细胞色素P450 4V2抗体 CYP4V2
细胞周期调控因子10抗体 CDC10
ZDHHC23蛋白抗体 ZDHHC23
β-葡萄糖脑苷脂酶抗体 GBA
ASCL2蛋白抗体 ASCL2
BEND3蛋白抗体 BEND3
跨膜蛋白Sema3C抗体 Sema3C
磷酸化HER4抗体 Phospho-HER4 (Tyr1284)
细胞荧光显微镜完全间接检测试剂盒（含一抗和荧光二抗）
大鼠破骨细胞siRNA转染试剂 500μl
微型RNA（miRNA）定量扩增分析试剂盒
ALAD; ALADH; ALADR; Aminolevulinate dehydratase; Aminolevulinate, delta, dehydratase; Delta aminolevulinic acid dehydratase; Delta-aminolevulinic acid dehydratase; HEM2_HUMAN; Lv; PBGS; Porphobilinogen synthase.
大鼠脐带间充质干细胞
小鼠主动脉瓣膜间质细胞
CW-2人结肠癌细胞
AR42J大鼠胰腺外分泌腺肿瘤细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；