实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠气管上皮细胞分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C”字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。
组织来源
产品规格
货号
用途
气管
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1520
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠气管上皮细胞采用-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠气管上皮细胞经PCK荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
冰冻切片组织PP2A蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
鱼肾上腺髓质素(ADM)elisa检测试剂盒
大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)elisa检测试剂盒
组织HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性检测试剂盒
豚鼠白介素8(IL8)elisa检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)elisa检测试剂盒
MYC蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
小鼠N-型电压依赖钙离子通道α1B亚基(CACNα1B)elisa检测试剂盒
caspase-8活性检测试剂盒分光光度法 20T、50T、100T
eIF2Bδ蛋白抗体 eIF2B4
FAM129B蛋白抗体 FAM129B
磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK2抗体 phospho-MARK2 (Ser595)
磷酸化血清应答因子抗体 Phospho-SRF (Ser77)
穿膜蛋白DLK2抗体 DLK2
单羧酸转运蛋4抗体 MCT4/SLC16A3
锌指蛋白293抗体 SNAI3
锌指蛋白689抗体 ZNF689
PerCP-Cy5.5标记人CD11b单克隆抗体 human CD11b/PerCP-Cy5.5
PE标记人TGF beta1单克隆抗体 human TGF beta 1/PE
生长2/胎盘特异性生长抗体 GH2
双亮氨酸拉链激酶DLK抗体 MAP3K12/ZPK
环指蛋白10抗体 RNF10
肌醇单磷酸酶2抗体 IMPA2
自然杀伤激活受体相关蛋白DAP12重组兔单克隆 TYROBP
19号染色体开放阅读框57抗体 C19orf57
人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)elisa检测试剂盒
大鼠气管上皮细胞组织CDK2/CYCLIN E激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
小鼠醛固酮(ALD)elisa检测试剂盒
EC 3.5.3.15; HL 60 PAD; HL-60 PAD; PAD 4; PAD; PADI 4; PADI 5; PADI H protein; PADI5; PDI 4; PDI 5; PDI4; PDI5; Padi4; PADI4_HUMAN; Peptidyl arginine deiminase type IV; Peptidyl arginine deiminase type V; Peptidylarginine deiminase IV; Protein arginine deiminase; Protein-arginine deiminase type IV; Protein-arginine deiminase type-4; Protein arginine deiminase type 4; Protein arginine deiminase type IV.
大鼠前列腺成纤维细胞
小鼠脂肪微血管内皮细胞
DAMI人巨核细胞白血病细胞
AsPC-1/GEM人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；