实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能，**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤**原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的道屏障，可粘附和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。
组织来源
产品规格
货号
用途
肾组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1589
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
大鼠内皮素转换酶2(ECE2)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)elisa检测试剂盒
小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)elisa检测试剂盒
人ADP-核糖基化因子4(ARF4)elisa分析检测试剂盒
细胞（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒
人层粘连蛋白-5(LN-5)elisa分析检测试剂盒
PH3-4显色（METHYL ORANGE）指示溶液
小鼠脂多糖结合蛋白(LBP)elisa检测试剂盒
大鼠内皮素受体B(ETRB)elisa检测试剂盒
F-box蛋白相关蛋白6抗体 FbxO6
FITC标记人CD86单克隆抗体 human CD86/FITC
磷酸肌醇磷脂酶c-delta-3抗体 PLCD3
卵透明带糖蛋白1抗体 ZP1
蛋白磷酸酶1调节亚基3C抗体 PPR3C
电压门控钾通道蛋白KVβ.2抗体 Kv beta 2
锌指蛋白结构域ZFYVE16抗体 ZFYVE16
嗅觉受体52K2抗体 OR52K2
Rab11家族相互作用蛋白2抗体 RAB11-FIP2
RAS样蛋白12抗体 RASL12
丝氨酸/苏氨酸激酶33抗体 STK33
松弛肽/松弛素抗体 Relaxin 1 + Relaxin 2
肌侧索硬化症相关蛋白FIG4抗体 FIG4
脊柱侧后凸畸形肽酶抗体 KY
17号染色体开放阅读框66抗体 C17orf66
3'-5'外切酶1蛋白抗体 HEXO
荧光细胞流式仪基础检测试剂盒（无一抗和二抗）
大鼠肾小球内皮细胞鸡补体蛋白3(C3)elisa分析检测试剂盒
蛋白电泳SYPRO橙色染色试剂盒
Neuropathy target esterase; NTEMND; Patatin like phospholipase domain containing 6; Patatin like phospholipase domain containing protein 6; Patatin-like phospholipase domain-containing protein 6; PLPL6_HUMAN; Pnpla6; SPG39; sws.
大鼠肾小球系膜细胞
小鼠牙髓干细胞
hacat人永生化表皮细胞
BCPaP人甲状腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；