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产品资料

大鼠食管成纤维细胞

大鼠食管成纤维细胞
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  • 产品名称:大鼠食管成纤维细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
大鼠食管成纤维细胞公司正在出售的产品:M2e(喉癌细胞) 磷酸化谷氨酸受体2B抗体 PPARGC1 ELISA Kit 过氧化物酶体增殖激活物受体检测试剂盒 利钠肽受体A抗体 人慢性骨髓性白血病细胞(耐药株);K562AZQR
产品描述
大鼠食管成纤维细胞

产品名称

大鼠食管成纤维细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

食管

生长特性

贴壁

细胞形态

成纤维细胞样

分类

大鼠原代细胞

货号

A01X1556

用途

仅供科研实验

培养信息:


培养基:基础培养基,含FBSbFGFInsulinPenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传2-3代左右

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

大鼠食管成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介:

大鼠食管成纤维细胞分离自食管组织;食管是咽和胃之间的消化管,食管在系统发生上起初很短,随着颈部的伸长和心肺的下降,而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之间的纵膈内,胸段通过膈孔与腹腔内腹相连,腹段很短与胃相连。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,食管使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中,黏膜层,包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜,由疏松结缔组织构成,富有血管、管及神经。主要包含食管成纤维细胞,成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介

实验室分离的大鼠食管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠食管成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

公司正在出售的产品:

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FKBP11

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P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体  Anti-PAK6

磷酸化Nemo样激酶抗体  Anti-Phospho-Nemo-like kinase (Thr298)

视黄酸激活基因8抗体  Anti-Stra8

PE-Cy3标记的兔抗牛IgG H&L

大鼠食管成纤维细胞Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy3

EXPH5蛋白抗体

GalNAc-T13; GalNAc T13; GalNAc transferase 13; N acetylgalactosaminyltransferase 13; Polypeptide GalNAc transferase 13; pp GaNTase 13; Protein UDP acetylgalactosaminyltransferase 13; UDP GalNAc:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 13; UDP N acetyl alpha D galactosamine:polypeptide; GLT13_HUMAN.

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HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮细胞

Bel-7402人肝癌细胞



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