实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
大鼠输卵管上皮细胞分离自输卵管组织;输卵管位于底两侧,包裹在阔韧带上缘内。自两角分别伸展至左、右卵巢,是输送卵细胞进入的管道,也是卵受精的场所。输卵管主要分漏斗部、壶腹部、峡部和部,管壁均由粘膜、肌层和浆膜三层组成。粘膜形成许多纵行而分支的皱襞,壶腹部的皱襞,高而多分支,故管腔不规则;至部的皱襞渐减少。粘膜上皮为单层柱状。由纤毛细胞和分泌细胞组成。纤毛细胞以漏斗部和壶腹部多,至峡部和部逐渐减少,纤毛向方向摆动,使卵移向并阻止病菌进入腹膜腔.分泌细胞表面有微绒毛,顶部胞质内有分泌颗粒,其分泌物构成输卵管液。输卵管上皮细胞在卵巢雌和孕的作用下,随月经周期而有变化。雌促进输卵管上皮细胞的生长的功能活动,在内膜增生晚期(排卵前)。纤毛细胞变成高柱状,纤毛增多,分泌细胞顶部充满分泌颗粒,功能旺盛。至分泌晚期,两种细胞均变矮,分泌细胞的分泌颗粒排空,纤毛细胞的纤毛也减少。
组织来源
产品规格
货号
用途
输卵管
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1626
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠输卵管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的大鼠输卵管上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠输卵管上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
小鼠白介素3(IL-3)elisa检测试剂盒
人胰岛素(INS)elisa检测试剂盒
酵母菌YNBA培养基
鱼卵泡刺(FSH)elisa分析检测试剂盒
大鼠瘦素(LEP)elisa检测试剂盒
多配体聚糖4抗体 Anti-Syndecan 4
RAN结合蛋白3抗体 Anti-RanBP3
Noxa蛋白抗体 Anti-Noxa
锌指蛋白ZBBX抗体 Anti-ZBBX
细胞周期蛋白依赖性激酶CABLES2抗体 CABLES2
线粒体核糖体蛋白L44抗体 MRPL44
β防御素3抗体 beta Defensin 3
氨基丁酸转运蛋白VGAT抗体 SLC32A 1
BCL2相关蛋白A1抗体 Bcl2A1
CD174抗体 CD174/FUT3
激酶C-SRC抗体 CSK
磷酸二酯酶6α抗体 PDE6A
肿瘤/睾丸抗原家族4亚型7抗体 GAGE7
周期素D相互作用蛋白1抗体 DMTF1
高尔基体卷曲螺旋蛋白2抗体 GCC2
谷胱甘肽S转移酶M2抗体 GSTM2
LITD1蛋白抗体 LITD1
MFSD5蛋白抗体 MFSD5
人CD86单克隆抗体 human CD86
溶质载体家族蛋白32成员A1抗体 SLC32A1
大鼠活化素A(ACV-A)elisa检测试剂盒
大鼠输卵管上皮细胞小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)elisa分析检测试剂盒
人REST协阻抑因子3(RCOR3)elisa检测试剂盒
FOXB1+FOXB2; FKH5; forkhead box B2; Forkhead box protein B1; Forkhead box protein B2; Transcription factor FKH 5; FOXB1_HUMAN; FOXB2_HUMAN.
大鼠输尿管上皮细胞
小鼠杏仁核神经元细胞
HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞
BEWO人胎盘绒毛膜癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;