实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠胃黏膜上皮细胞分离自胃黏膜组织；胃黏膜柔软，活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞，充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞，突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层，即上皮层（单层柱状上皮）、固有层（由结缔组织构成、含有大量的胃腺）和黏膜肌层（为薄层平滑肌、排列成内环外纵）。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层，细胞为单层柱状上皮，排列整齐，能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、、对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而的模型。
组织来源
产品规格
货号
用途
胃组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1557
仅供科研研究实验
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠胃黏膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠胃黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
人多巴胺(DA)elisa检测试剂盒
甲型流感H7N7 HA elisa分析检测试剂盒
溶酶体脂酶（酸性脂酶）活性比色法定量检测试剂盒
小鼠肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)elisa检测试剂盒
大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)elisa检测试剂盒
神经细胞特异性微管蛋白抗体 Anti-TUBB3/beta III Tubulin(Neuronal Marker)
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗体 Anti-RAB40A
脂质运载蛋白抗体 Anti-NGAL/Lipocalin 2
线粒体外膜孔蛋白3抗体（电压依赖阴离子通道蛋白3） Anti-VDAC3
腺病毒早期E1A蛋白抗体 Adenovirus 5 E1A
心脏钾离子通道蛋白亚基2抗体 KCNG2
白介素2受体γ链抗体 IL-2R gamma
胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1抗体 CUG-BP1
CD5单克隆抗体 CD5
CYP27B1单克隆抗体 CYP27B1
磷酸化Ets转录因子家族ets1抗体 phospho-ETS1 (Thr38)
磷酸化叉头蛋白O6抗体 phospho-FOXO6 (Ser184)
猪水肿病-志贺样Ⅱ型变异体A抗体 Shiga-like toxin IIe variant subunit A
转录因子LHX6抗体 LHX6
光导蛋白样蛋白PDCL3抗体 PDCL3
核过渡蛋白2抗体 STP2
MYCNOS蛋白抗体 MYCNOS
NMDA受体调节1抗体 NARG1
溶质载体转运蛋白家族35成员B4抗体 SLC35B4
神经诱导胚胎发育相关蛋白Churchill抗体 CHURC1
脂类代谢检测试剂专题
大鼠胃黏膜上皮细胞小鼠MAP激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)elisa检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子B(PDGFB)elisa检测试剂盒
1 alpha 25 dihydroxyvitamin D3 inducible; DDVit 1; DDVIT1; EDAF-1; EDAF1; EDPF-1; EDPF1; Enterocyte differentiation associated factor EDAF 1; Enterocyte differentiation promoting factor; Enterocyte differentiation-associated factor 1; Enterocyte differentiation-promoting factor 1; Methyl methanesulfonate sensitive 2; MMS 2; MMS2; MMS2 homolog; UB2V2_HUMAN; UBE2V 2; UBE2V2; Ubiquitin conjugating enzyme E2 variant 2; Ubiquitin conjugating enzyme E2v2; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 2; UEV 2; UEV2; Vitamin D3 inducible protein; Vitamin D3-inducible protein.
大鼠胃平滑肌细胞
小鼠心肌细胞
HEK-293（293）人胚肾细胞
BICR 22人头颈部鳞状细胞癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；