实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
大鼠脂肪干细胞分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的系统。脂肪干细胞（ADSCs）是一种具有多向分化潜能的干细胞，主要恢复组织细胞的修复功能，促进细胞的再生，恢复年轻面容的同时，身体机能也得到充分改善，有效改善亚健康、早衰等，由内而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干细胞具有很多优点：①具有自我更新及多向分化的潜能；②来源充足；③对供区的创伤较小；④获得率及体外扩增速率高。脂肪干细胞是目前被广泛应用于组织工程领域中理想的种子细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
脂肪组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1664
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的大鼠脂肪干细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠脂肪干细胞经CD90荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
ASMAELISAKit
大鼠CD19分子(CD19)elisa分析检测试剂盒
CD19 ELISA Kit
人高半胱氨酸(Hcy)elisa分析检测试剂盒
HCYELISAKit
Saitohin蛋白抗体 Anti-STH/Saitohin
Rho相关蛋白激酶2抗体 Anti-ROCK2
肉豆蔻酰基转��酶2-N端肽抗体 Anti-NMT2
锌指蛋白ZBTB38抗体 Anti-ZBTB38
组织胺N-甲基转移酶抗体
HNMT
高尔基复合体相关蛋白1抗体
ACBD3
RIPA裂解液（蛋白裂解液）50ml
细胞RUNX3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
小鼠白介素6(IL6)elisa检测试剂盒
大鼠5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亚基(PRKAA2)elisa检测试剂盒免费代测
原钙粘蛋白β11抗体
PCDHB11
凋亡加强结构域蛋白6抗体
CARD6
内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗体 Anti-TEM1/CD248
蛋白酶活化受体4抗体 Anti-PAR4
磷酸化蛋白激酶Aβ抗体 Anti-phospho-PKA beta(Ser338)
神经细胞囊泡循环蛋白4抗体 Anti-Synaptogyrin 4
PE标记的小鼠抗兔IgG H&L
大鼠脂肪干细胞Mouse Anti-Rabbit IgG H&L / PE
味觉受体蛋白家族2亚基7抗体
AZK; Cervical cancer suppressor gene 4 protein; HCCS 4; HCCS-4; HCCS4; Human cervical cancer suppressor gene 4 protein; Leucine zipper and sterile alpha motif containing kinase; Leucine zipper- and sterile alpha motif-containing kinase; Mitogen activated protein kinase kinase kinase MLT; Mitogen-activated protein kinase kinase kinase MLT; Mixed lineage kinase 7; Mixed lineage kinase related kinase; Mixed lineage kinase related kinase MRK beta; Mixed lineage kinase with a leucine zipper and a sterile alpha motif; Mixed lineage kinase-related kinase; MLK 7; MLK like mitogen activated protein triple kinase; MLK related kinase; MLK-like mitogen-activated protein triple kinase; MLK-related kinase; MLK7; Mlklak; MLT; MLTK; MLTK_HUMAN; MRK; Sterile alpha motif and leucine zipper containing kinase AZK; Sterile alpha motif- and leucine zipper-containing kinase AZK; ZAK.
大鼠脂肪细胞
小鼠输卵管平滑肌细胞
HS746T人胃癌细胞
C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纤维细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；