细胞简介:
人乳腺上皮细胞分离自乳腺组织;乳腺是复管泡状皮肤腺,主要由腺上皮细胞组成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,导管末梢发育成腺泡;近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系,体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是的腺体组织,乳腺由导管和腺泡组成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内和局部合成的生长因子共同调控,其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮细胞分离自分娩后3-5天的乳腺组织,为贴壁生长型细胞,呈多角形、圆形以及短梭形;乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。
组织来源
产品规格
货号
用途
乳腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1368
仅供科研研究实验
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的人乳腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人乳腺上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
DMEM完全培养液(无)
小鼠热休克转录因子1(HSF1)elisa检测试剂盒
大鼠肝细胞生长因子(HGF)elisa检测试剂盒
组织样品组织D(CATHEPSIN D)活性比色法定量检测试剂盒
人多肽YY(Peptide-YY)elisa检测试剂盒
巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片胶原纤维(GIESON)染色试剂盒
小鼠含亮氨酸丰富重复蛋白3C(LRRC3C)elisa检测试剂盒
大鼠白介素3(IL-3)elisa检测试剂盒免费代测
微管相关丝氨酸/苏氨酸白激酶样抗体 MASTL
细胞凋亡调控蛋白ZDHHC16抗体 ZDHHC16
SKAP55蛋白抗体 SKAP55
TIP41样蛋白抗体 TIPRL
AF680标记的KB抑制蛋白激酶ε抗体 IKB epsilon, Alexa Flour 680 conjugated
AF750标记的核因子κB抑制蛋白E抗体 IKBKE, Alexa Flour 750 conjugated
结肠癌抗原8抗体 SDCCAG8
精子运动结构域蛋白1抗体 MOSPD1
有丝分裂原诱导基因6抗体 MIG6
载脂蛋白L5抗体 APOL5
纺锤体样蛋白4抗体 SPIN4
富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1抗体 LGI1
G蛋白偶联受体71抗体 TAS1R2
HERC2 E3泛素蛋白连接酶抗体 HERC2
鸟苷酸释放因子p532蛋白抗体 HERC1
庆大霉素抗体 Gentamicin
人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa检测试剂盒
人乳腺上皮细胞破骨细胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量检测试剂盒
小鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)elisa检测试剂盒
HCV-NS4a; Non-structural protein 4A; NS4A; POLG_HCVBK; p8.
人软骨细胞
小鼠皮肤成纤维细胞
MDA-MB-453人乳腺癌细胞
COLO 679人黑素瘤细胞