细胞简介:
人食管成纤维细胞分离自食管组织;食管是咽和胃之间的消化管,食管在系统发生上起初很短,随着颈部的伸长和心肺的下降,而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之间的纵膈内,胸段通过膈孔与腹腔内腹相连,腹段很短与胃相连。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,食管使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中,黏膜层,包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜,由疏松结缔组织构成,富有血管、管及神经。主要包含食管成纤维细胞,成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
组织来源
产品规格
货号
用途
食管
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1285
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基:基础培养基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人食管成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介:
实验室分离的人食管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人食管成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
F0F1-ATP酶/ATP合成酶测试盒 20管/10样
人超敏热休克蛋白60(HSP-60)elisa检测试剂盒
细胞磷酸二酯酶1(PDE1)活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒
小鼠糖皮质受体α(GR-α)elisa分析检测试剂盒
大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒
驴雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片游离毛地黄皂苷法(DIGITONIN)舒尔茨染色试剂盒
小鼠环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒
大鼠胞外铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)elisa分析检测试剂盒
Avi-Tag 抗体 Avi-Tag
B细胞新型蛋白1抗体 BCNP
赖氨酸甲基化抗体 Methylated Lysine (di methyl , mono methyl )
亮氨酸拉链抑癌蛋白2抗体 LZTS2
α-乳清蛋白单克隆抗体 alpha Lactalbumin
样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 OPCML
细胞角蛋白2e抗体 Cytokeratin 2e
细胞色素P450ⅡE1抗体 CYP2E1
KRBA2蛋白抗体 KRBA2
MAP激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶1抗体 MNK1
热休克蛋白-22抗体 HSP22
溶菌酶样蛋白1抗体 LYZL1
干扰素-γ/IFN-γ抗体 IFN gamma
谷氨酸受体2B抗体 NMDAR2B
着丝粒蛋白T抗体 CENPT
肿瘤蛋白D53抗体 TPD52L1
大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)elisa检测试剂盒
人食管成纤维细胞小鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa分析检测试剂盒
脑脊液蛋白测试盒 50管/48样 磺基水杨酸法
Liver X receptor alpha; LXR a; LXRa; LXRA; NR1H3; NR1H3_HUMAN; Nuclear orphan receptor LXR alpha; Nuclear receptor subfamily 1 group H member 3; Oxysterols receptor LXR alpha; Oxysterols receptor LXR-alpha; RLD 1; RLD1.
人食管平滑肌细胞
小鼠脑血管周细胞
MHCC-97L人高转移性肝癌细胞
COLO-60H人结肠癌细胞