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产品资料

人外周血单个核细胞

人外周血单个核细胞
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  • 产品名称:人外周血单个核细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
人外周血单个核细胞公司正在出售的产品:MV-4-11人髓性单核细胞白血病细胞 胰岛素受体底物-3抗体 TE ELISA Kit 端粒酶检测试剂盒 锌指蛋白798抗体 人骨肉瘤细胞荧光素酶;HOS/LUC (STR)
产品描述
人外周血单个核细胞

细胞简介:


人外周血单个核细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。

组织来源

产品规格

货号

用途

外周血

5×105cells/T25细胞培养瓶

A01X1451

仅供科研研究实验

培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 半贴半悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖;不传代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%CO25%

方法简介

公司实验室分离的人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人外周血单个核细胞经过检测,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

实验具体步骤:


(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净;
(3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中;
(4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,

利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)

(6)种植组织块:将上述组织使用2X双抗冰冷PBS洗涤3次,每次5min,然后使用完全培养基(含有1X双抗)洗涤一次。经过的心脏破碎组织块经过离心后,可以用细头

镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的
盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);


(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;

(8)贴壁细胞传代:当单个细胞从组织块爬出面积在组织块3-5倍,进行传代,此时可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化组织块爬出的细胞,消化时间根据正常细胞消化时间即可,当然可以在消化过程中不断管擦爬出细胞的皱缩情况,一旦达到消化完成(皱缩细胞≥70%)即可使用完全培养基终止消化。在吹打单个细胞时候,一定要轻柔/缓慢,不能吹打到组织块,如果组织块掉下来,大概率是不会再贴壁成功啦。

根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;

(9)鉴定:细胞在传代至代、第五代、第十代时候可以将部分细胞进行鉴定,鉴定办法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式细胞术等。

实验方法:

一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织���料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。

公司正在出售的产品:


NADH氧化酶(NOX)测试盒

兰花Vacin & Went培养基

兔白介素18IL18elisa检测试剂盒

大鼠凝聚素(CLU)elisa检测试剂盒免费代测

冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

草酸含量试剂盒

冰冻切片组织COLLAGEN I蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

小鼠白三烯B4(LTB4)elisa检测试剂盒免费代测

大鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)elisa检测试剂盒

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MAK抗体 Serine/threonine protein kinase MAK

丝切蛋白抗体 Cofilin

PE标记人/小鼠CD45R单克隆抗体 human/mouse CD45R/PE

PE标记小鼠H-2K(D)/H2-D1单克隆抗体 mouse H-2K(D)/H2-D1/PE

14-3-3β抗体 14-3-3 beta

1号染色体开放阅读框49抗体 C1orf49

环指蛋白212抗体 RNF212

肌钙集蛋白/收钙素抗体 Calsequestrin

信号转导衔接结合蛋白抗体 STAMBP

血管假性血友病因子重组兔单克隆抗体 VWF

胆碱/乙醇胺磷酸转移酶1抗体 CEPT1

蛋白磷酸酶γ1抗体 PP1C gamma

FAM160A1蛋白抗体 FAM160A1

FBXO10蛋白抗体 FBXO10

磷酸化异染色质蛋白1抗体(果蝇) phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr24)

卵磷酯胆固醇酰基转移酶抗体 LCAT

细胞核膜蛋白提取试剂盒100T

人外周血单个核细胞大鼠谷胱甘肽S转移酶(GSTs)elisa检测试剂盒免费代测

细胞基质金属(MMP-8)活性比色法定量检测试剂盒

Gacy; Galactocerebrosidase; Galactocerebroside beta galactosidase; Galactosylceramide beta galactosidase; galactosylceraminidase; Galc; GALCERase; Twitcher; GALC_HUMAN.

人外周血巨噬细胞

小鼠脉络膜微血管内皮细胞

NB 4急性早幼粒细胞株

COV644人卵巢癌细胞


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