实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
人牙髓干细胞分离自滑膜组织；牙髓组织位于牙齿内部的牙髓腔内。牙髓腔的外形与牙体形态大致相似，牙冠部髓腔较大，称髓室，牙根部髓腔较细小，称根管，根尖部有小孔，称根尖孔。牙髓组织主要包含神经、血管，和结缔组织，还有排列在牙髓外周的造牙本质细胞，其作用是造牙本质。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及机体抵抗力的差异，出现不同的病理变化，在临床上会表现为一系列不同的症状和体征。牙髓充血状况持续时间较长后，转化为急性牙髓炎症。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能，具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
牙髓组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1467
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的人牙髓干细胞采用胶原酶消化法、低密度稀释克隆制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人牙髓干细胞经CD90荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
谷胺酰氨溶液（100X）
小鼠球蛋白G1(IgG1)elisa检测试剂盒
大鼠蛋白激酶C(PKC)elisa检测试剂盒
细胞半胱-3（CASPASE-3）活性比色法定量检测试剂盒
人程序性细胞死亡因子4(PDCD4)elisa分析检测试剂盒
细胞脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）细胞流式分析试剂盒
丙酮酸（PA)含量测试盒
糖果环（cyclamate）含量薄层色谱法定性检测试剂盒
小鼠补体成分5a受体1(C5aR1)elisa检测试剂盒
突触后密度蛋白95抗体 PSD95
微管蛋白抗体 beta Tubulin (Loading Control)
RSPRY1蛋白抗体 RSPRY1
SH3TC1蛋白抗体 SH3TC1
8号染色体开放阅读框86抗体 C8orf86
AF647标记的CD34单克隆抗体 CD34, Alexa Fluor 647 conjugated
钾离子通道蛋白家族成员3抗体 KCNE3
角蛋白相关蛋白KAP3.2抗体 KAP3.2
乙酰化化组蛋白H2B (Lys12)抗体 Histone H2B (Acetyl K12)
硬纤毛蛋白STRC抗体 STRC
二氢嘧啶脱氢酶抗体 DPYD
防御素α1/3抗体 DEFA1/alpha Defensin 1
GRAMD4蛋白抗体 GRAMD4
G蛋白偶联受体18抗体 GPR18
囊泡乙酰胆碱通道抗体 Vesicular Acetylcholine Transporter
嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗体 NPEPPS
牛维生素C(VC)elisa分析检测试剂盒
人牙髓干细胞C. albicans RFLP基因分析试剂盒
小鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)elisa检测试剂盒
epidermal growth factor receptor pathway substrate 15- ike 1; Epidermal growth factor receptor substrate 15 like 1; epidermal growth factor receptor substrate EPS15R; Eps15 related protein; eps15R;EP15R_HUMAN.
人牙龈成纤维细胞
小鼠口腔黏膜上皮细胞
NCI-h1688人经典小细胞肺癌细胞
CTX-TNA2大鼠脑I型星形胶质细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；