实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
人牙周膜干细胞分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能，具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜干细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织的重要手段。
组织来源
产品规格
货号
用途
牙周膜组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1466
仅供科研研究实验
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介：
公司实验室分离的人牙周膜干细胞采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人牙周膜干细胞经CD44荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品：
α1-AGPELISAKit
大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)elisa分析检测试剂盒
SP-A ELISA Kit
豚鼠Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)elisa分析检测试剂盒
GuineapigKL-6(KrebsyondenLundgen-6)ELISAKit
小鼠钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2)elisa检测试剂盒
仓鼠血红素氧合酶1(HO-1)elisa分析检测试剂盒
细胞CYTOCHROME C蛋白表达��色法定量检测试剂盒
牛氧杂蒽氧化酶elisa分析检测试剂盒
过氧化氢酶elisa分析检测试剂盒
Camel catalase ELISA kit
人低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa分析检测试剂盒
HumanHIF-1αELISAKit
体液总胆汁酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒
人电压门控钾通道(VGKC)elisa检测试剂盒
大鼠钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2)elisa检测试剂盒免费代测
辅酶Q10含量测试盒
肌微管素相关蛋白10抗体
MTMR10
22号染色体开放阅读框23抗体
C22orf23
瞬时表达轴索糖蛋白1抗体 Anti-TAG1/CNTN2
肿瘤抑制基因LUCA15抗体 Anti-RBM5/LUCA15
孤儿核受体蛋白Nur77抗体 Anti-Nur77/GFRP
长链脂肪酸转运蛋白1抗体 Anti-SLC27A1
胶体金标记的兔抗大鼠IgG H&L
人牙周膜干细胞Rabbit Anti-Rat IgG H&L / Gold
磷酸化丁酸盐反应因子1抗体
YRRM2; RNA binding motif protein, Y chromosome, family 1 member F/J; RNA binding motif protein, Y linked, family 1, member F; Y chromosome RNA recognition motif 2; YRRM2; RBY1F_HUMAN.
人羊膜间充质干细胞
小鼠颈动脉成纤维细胞
NCI-H2126 人肺癌细胞
D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；