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产品资料

人真皮成纤维细胞

人真皮成纤维细胞
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  • 产品名称:人真皮成纤维细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
人真皮成纤维细胞公司正在出售的产品:NCI-H1437人非小细胞肺癌细胞 DDX58抗体 SREBP-1C ELISA Kit 固醇调节元件结合蛋白检测试剂盒 ATP结合转运因子2抗体 人高分化脂肪肉瘤细胞;94T778
产品描述
人真皮成纤维细胞

产品名称

人真皮成纤维细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

皮肤组织

生长特性

贴壁

细胞形态

成纤维细胞样

分类

原代细胞

货号

A01X1400

用途

仅供科研实验

培养信息:


培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%CO25%

细胞简介:

人真皮成纤维细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

方法简介

公司实验室分离的人真皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人真皮成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、、酵母和等。

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

公司正在出售的产品:

人水通道蛋白-2AQP2elisa检测试剂盒

胰岛素基因增强结合蛋白2抗体

Islet 2

DNA修复酶相互作用蛋白抗体

APLF

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5bTRACP 5belisa检测试剂盒

超敏C反应蛋白Hs-CRP试剂盒 R140ml×1 R210ml×1 胶乳增强

冰冻切片组织线粒体复合物I蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

牛胰岛素(Insulin)elisa分析检测试剂盒

CTR1抗体

MT

21号染色体开放阅读框87抗体

C21orf87

肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体  Anti-TRIP

Rho GTP酶激活蛋白29抗体  Anti-Rho GTPase activating protein 29

核因子κB抑制蛋白β抗体  Anti-IKB beta

原基因18家族STMN3蛋白抗体  Anti-STMN3

乙型肝炎病毒X蛋白上调基因11抗体

VWCE

DENND1C蛋白抗体

DENND1C

蛋白磷酸酶2抗体  Anti-SHP-2/PTPN11

核抑制蛋白磷酸酶1抗体  Anti-NIPP1/ARD1

视黄醛脱氢酶2型抗体  Anti-RALDH2

TBR1蛋白抗体  Anti-TBR1

大鼠封闭蛋白4(CLDN4)elisa分析检测试剂盒

人真皮成纤维细胞CLDN4 ELISA Kit

豚鼠白介素13(IL-13)elisa分析检测试剂盒

CMAP; CST 7; CST7; Cystatin 7; Cystatin-7; Cystatin7; Cystatin like metastasis associated protein; CystatinF; Cystatin-F; Cystatin F; Leukocystatin.

人真皮毛细胞

小鼠结肠粘膜上皮细胞

NCI-H295R人肾上腺皮质细腺癌细胞

DC2.4(小鼠树突状瘤细胞)



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