实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
人脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。
组织来源
产品规格
货号
用途
脂肪组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1441
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的人脂肪细胞采用胰蛋白酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
公司正在出售的产品:
豚鼠白介素6(IL-6)elisa检测试剂盒
人白介素-1α(IL-1α)elisa检测试剂盒
组织CDK1/CYCLIN B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
小鼠趋化因子C-X-C-基元受体4(CXCR4)elisa检测试剂盒
大鼠核纤层蛋白A/C(LMNA)elisa检测试剂盒
大鼠微管关联蛋白4(MAP4)elisa检测试剂盒
纯化线粒体膜通道孔(MPTP)比色法检测试剂盒
细胞色素b5含量测试盒 50T/48样 比色法
通用型猪流感(SI)基因检测试剂盒
APC标记人CD123单克隆抗体 human CD123/APC
ATP依赖RNA解旋酶DDX60样蛋白抗体 DDX60L
抗凝血酶3抗体 SERPINC1
快速周期调节蛋白SPDYE1抗体 SPDYE1
V5-tag标签单克隆抗体 V5 tag
α2巨球蛋白(α-2M)抗体 alpha 2 Macroglobulin
舞蹈症相关蛋白KALRN抗体 KALRN
细胞角蛋白13重组兔单克隆抗体 Cytokeratin 13
JAGN1蛋白抗体 JAGN1
KIF20A单克隆抗体 KIF20A
亲环素C抗体 PPIC
染色体浓缩调控蛋白1单克隆抗体 RCC1
钙调神经磷酸酶CSTP1抗体 CSTP1
感光细胞转录因子TULP3抗体 TULP3
原钙粘附蛋白β1抗体 PCDHB1
整合素样金属蛋白酶与凝血酶样4蛋白抗体 ADAMTSL4
大鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶2(βACE2)elisa检测试剂盒
人脂肪细胞小鼠花生四烯酸12 - 脂氧合酶,12S型(Alox12/Alox12p)elisa分析检测试剂盒
ECL化学发光检测试剂盒200ml
GCE; GCSP; GCSP_HUMAN; GLDC; Glycine cleavage system P protein; glycine cleavage system protein P; Glycine decarboxylase; glycine decarboxylase P protein; Glycine dehydrogenase (decarboxylating) mitochondrial; Glycine dehydrogenase [decarboxylating], mitochondrial; Gycine dehydrogenase (decarboxylating); HYGN1; MGC138198; MGC138200; NKH.
人直肠平滑肌细胞
小鼠角质形成细胞
NCI-H460 [H460] 人大细胞肺癌细胞
DMS 114人小细胞肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;