细胞简介:
人直肠平滑肌细胞分离自直肠组织;直肠为大肠的未段,位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿过盆膈,下端以而终。直肠上端的大小似结肠,其下端扩大成直肠壶腹,是粪便排出前的暂存部位,下端变细接。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切,与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带,位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉,来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式;肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
组织来源
产品规格
货号
用途
直肠组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1306
仅供科研研究实验
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:
公司实验室分离的人直肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人直肠平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死; (2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;
实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
公司正在出售的产品:
MousemuscarinicacetylcholinereceptorM2(mAChRM2)autoantibodyELISAkit
睾酮(T)elisa分析检测试剂盒
T ELISA kit
人蛋白激酶B(PKB)elisa分析检测试剂盒
PKBELISAKit
大鼠载脂蛋白B100(APOB100)elisa检测试剂盒
纯化线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒
山羊还原型谷胱甘肽(GSH)elisa检测试剂盒免费代测
植物源性食品土豆(potato)基因检测试剂盒
组蛋白乙酰转移酶KAT7抗体
KAT7
ADP核糖基化因子结合蛋白抗体
ARFBP1
大鼠内皮抑素(ES)elisa检测试剂盒
EDTA二钾血液抗凝液
土壤酸性蛋白酶(S-ACPT)测试盒
通用型甜菜坏死黄脉病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus; BNYVV)基因检测试剂盒
Rab溶酶体相互作用蛋白样2抗体
RILPL2
脑蛋白4抗体
Cerebral protein 4
14-3-3β抗体 Anti-14-3-3 beta
原钙粘附蛋白12/血管内皮钙粘蛋白2抗体 Anti-PCDH12
蛋白质磷酸酶2调节亚基3A抗体 Anti-PPP2R3A
泛素融合降解样蛋白1抗体 Anti-UFD1L
PE标记的羊抗豚鼠IgG H&L
人直肠平滑肌细胞Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE
锌指蛋白57抗体
Calcium/calmodulin dependent protein kinase ID; Calcium/calmodulin dependent protein kinase type 1D; CaM K1; CaM KI delta; CaM kinase I delta; CaM kinase ID; CAMK 1D; Camk1D; CaMKI delta; CamKI like protein kinase; CaMKID; CKLiK.
人主动脉内皮细胞
小鼠角膜上皮细胞
NCI-H508人结肠直肠腺癌细胞
DMS 53人肺癌细胞