实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
垂体是机体的重要的腺体,由生长**和促肾上腺皮质**细胞等细胞构成,在机体的生长发育、生命活动、调节以及衰老死亡过程中起着重要意义。因此,垂体细胞的体外培养为进一步研究垂体与生殖的神经调节机制及垂体移植研究等方面提供了基础和前提。
组织来源
产品规格
货号
用途
垂体组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1611
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常垂体组织。
2)细胞鉴定:LH、FSH与PRL荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
TELISAKit
仓鼠白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析检测试剂盒
IL-8/CXCL8 ELISA kit
人凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)elisa分析检测试剂盒
Apaf-1ELISAKit
BCA蛋白法含量测试盒
大鼠胰岛素(INS)elisa检测试剂盒
饮料氟元素比色法定量检测试剂盒
小鼠S100钙结合蛋白A4(S100A4)elisa检测试剂盒
IQCF1蛋白抗体
IQCF1
多功能DNA修复酶重组兔单克隆抗体
APEX1
组织副伤B(Salmonella Paratyphi B)定性基因检测试剂盒
小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa检测试剂盒
大鼠脂多糖/内(LPS)elisa检测试剂盒免费代测
细胞PP2A蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Rab27a蛋白抗体
Rab27a
跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体
CEE
泛素蛋白连接酶E1抗体 Anti-UBCH6/UBE2E1
蛋白酶激活受体4抗体 Anti-PAR4
石骨症相关蛋白PLEKHM1抗体 Anti-PLEKHM1
T细胞激活蛋白抗体 Anti-Sca1/Ly6A/E
胶体金标记的驴抗豚鼠IgG H&L
大鼠垂体细胞大鼠儿茶酚胺(CA)elisa检测试剂盒
组织a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶联比色法定量检测试剂盒
UNQ9415; Apoptosis related cysteine protease; CASP 12; casp12; CASP12P1; Caspase 12 pseudogene 1; CASP-12; casp12; caspase 12 (gene/pseudogene); Caspase12; CASPC_HUMAN; OTTHUMP; OTTHUMP; OTTHUMP; OTTHUMP; OTTHUMP; UNQ9415.
大鼠垂体细胞
兔海绵体内皮细胞
MDCK狗肾转化细胞
LMH鸡肝癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;