实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
膈肌是位于胸腔与腹腔之间的肌肉纤维组织，其周围为肌腹，中央为腱膜，是机体重要的呼吸肌。
组织学上，膈肌属骨骼肌，成熟的骨骼肌纤维不具有增殖能力。骨骼肌卫星细胞是骨骼肌与肌膜之间的一种体积较小的细胞，排列在肌纤维的表面，当肌纤维损伤后，可分化为肌纤维修复损伤。随着组织发育的成熟，肌卫星细胞数量相对减少。
组织来源
产品规格
货号
用途
膈肌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1667
仅供科研研究实验
细胞特性：
1） 细胞来源于实验动物正常膈肌组织。
2） 细胞鉴定：肌动蛋白（α-actin）荧光染色为阳性。
3） 经鉴定细胞纯度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5） 细胞生长方式：长梭状细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代骨骼肌 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
公司正在出售的产品：
大鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa检测试剂盒
大鼠CD19分子(CD19)elisa分析检测试剂盒
小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)elisa检测试剂盒
脑组织蛋白提取试剂盒50T
组织氧化型甘肽（GSSG）浓度高效液相色谱定量检测试剂盒
纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法定量检测试剂盒
大鼠粘胶蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)elisa检测试剂盒
通用型嗜肺军团菌（Legionella pneumophilia）基因检测试剂盒
小鼠β内啡肽(β-EP)elisa检测试剂盒
腺苷A1受体抗体 ADORA1
心脏特异性源盒转录因子NKX2.5抗体 Nkx2.5
白介素32抗体 IL32
胞浆-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗体
CD68单克隆抗体 CD68
C-反应蛋白单克隆抗体 CRP(C11F2)
磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体 phospho-FADD (Ser194)
磷酸化叉头蛋白家族1抗体 Phospho-FoxO1 (Ser256)
猪瘟病毒 CSFV
转录因子MAFF抗体 MAFF
胱氨酸抗体 CTNS
核呼吸因子-1重组鼠单克隆抗体 NRF1
Myc基因肺癌相关蛋白抗体 MYCL
NMRAL1蛋白抗体 NMRAL1
溶质载体转运蛋白家族35成员E1抗体 SLC35E1
神经生长因子4/5抗体 Neurotrophin 4
冰冻切片组织线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
大鼠膈肌细胞大鼠酸性磷酸酶(ACP)elisa检测试剂盒
格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；GMS）银染试剂盒
INF Omega; Interferon Omega; IFNW1; IFNW1_HUMAN; Interferon alpha II 1; Interferon alpha-II-1; Interferon omega 1; Interferon omega-1; INF ω.
大鼠膈肌细胞
兔骨骼肌细胞
A2780+GFP人卵巢癌细胞+GFP
LS1034人直肠癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；