实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
肌腱细胞是肌腱组织的基本功能单位,主要合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和糖蛋白基质,维持肌腱组织的新陈代谢。
肌腱损伤后的方式包括内源性和外源性,而理想的方式是控制外源性,促进内源性。内源性的机制是肌腱细胞通过细胞自身的增殖从而促进肌腱,但目前肌腱细胞在体外经过多次传代培养后会丧失分裂增殖能力。
目前已知多种因素影响肌腱过程,其中与肌腱关系密切的有着重要调控作用的细胞因子主要有:碱性成纤维生长因子,转化生长因子 β,骨形态发生蛋白-12,血管内皮生长因子,胰岛素样生长因子-1,血小板源性生长因子等。
组织来源
产品规格
货号
用途
肌腱组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1677
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的肌腱组织。
2) 细胞鉴定:Ⅰ型胶原荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代肌腱 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
ACTHELISAKit
环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
cAMP ELISA Kit
人单胺氧化酶(MAO)elisa分析检测试剂盒
MAOELISAKit
人促胰液素/胰泌素(Secretin)elisa检测试剂盒
单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)鉴定
小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)elisa检测试剂盒
大鼠皮质酮(CORT)elisa检测试剂盒
角蛋白相关蛋白KCP2抗体
KCP2
尾型源盒转录因子4抗体
CDX4
人EB病毒核抗原3A抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
细胞CaM KII激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
小鼠趋化因子5(CCL5/RANTES)elisa检测试剂盒
大鼠核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)elisa检测试剂盒
环指蛋白9抗体
RNF9
KLHL1蛋白抗体
KLHL1
解旋酶SNF2L抗体 Anti-SMARCA1/SNF2L
旁瘤抗原MA1抗体 Anti-PNMA1
多型性腺瘤基因样蛋白1抗体 Anti-PLAGL1/ZAC1
泛素结合酶E2O抗体 Anti-UBE2O/E2 230K
胶体金标记的小鼠抗人IgM
大鼠肌腱细胞小鼠的牛血清白蛋白残留检测elisa分析检测试剂盒
猴白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒
CAHM1_HUMAN; Calcium homeostasis modulator 1; Calcium homeostasis modulator protein 1; CALHM1; FAM26C; Family with sequence similarity 26, member C; MGC39514; MGC39617; Protein FAM26C.
大鼠肌腱细胞
兔睾丸间质细胞
CBRH7919大鼠肝癌细胞
Lu-143人小细胞肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;