实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
甲状腺是人体大的腺。棕红色,分左右两叶,中间相连,呈 H形。甲状腺滤泡是甲状腺的基本结构单位。此外,甲状腺中以及外围还有部分结缔组织,这些结缔组织是由成纤维细胞组成,对滤泡起到保护作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
甲状腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1608
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常甲状腺组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
人肌酸激酶(CK)elisa检测试剂盒
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒
细胞总游离菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒
小鼠活化素A(ACV-A)elisa检测试剂盒
大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)elisa分析检测试剂盒
人白介素35(IL-35)elisa检测试剂盒免费代测
单酸甘油脂脂解酶(monoacylglycerol lipase)活性比色法定量检测试剂盒
小鼠血浆激肽释放酶(KLKB1)elisa检测试剂盒
大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)elisa检测试剂盒
FAM70A蛋白抗体 FAM70A
FITC标记人CD11c单克隆抗体 human CD11c/FITC
磷酸化周期素依赖激酶2抗体 Phospho-CDK1 (Thr14)
菱形结合域源蛋白RHBDF1抗体 RHBDF1
蛋白激酶C结合蛋白1抗体 PRKCBP1
氮酶调节因子3样蛋白抗体 NPRL3
锌指蛋白841抗体 ZNF841
嗅觉受体52J3抗体 OR52J3
PRDM锌指转录因子PRDM4抗体 PRDM4
ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗体 Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶19抗体 STK19
丝裂原活化蛋白激酶底物1抗体 SAKS1/2B28
肌球蛋白7a/常染色体隐性耳聋蛋白2抗体 Myosin VIIa
激活素受体1B抗体 ACVR1B
12号染色体开放阅读框49抗体 C12ORF49
4号染色体开放阅读框40抗体 C4orf40
3’端衔接体(LINKER)连接试剂盒
大鼠甲状腺成纤维细胞Dog IgM / PE
锌指蛋白827抗体
E2 F1; E2-F1; L UBC; L-UBC; UB2L3_HUMAN; UBCE7; UbcH7; UbcM4; Ube2l3; Ubiquitin carrier protein L3; Ubiquitin conjugating enzyme E2 L3; Ubiquitin protein ligase L3; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 L3; Ubiquitin-conjugating enzyme E2-F1; Ubiquitin-protein ligase L3.
大鼠甲状腺成纤维细胞
兔肝外胆管上皮细胞
CFSC-8B大鼠肝星形细胞
LU65人非小细胞肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;