实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉,前者分布至头顶部和颜面部,后者进入颅内分布至脑和眼眶内。主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜层主要由成纤维细胞构成。
组织来源
产品规格
货号
用途
颈动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1547
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常颈动脉组织。
2) 细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠骨形成蛋白6(BMP6)elisa检测试剂盒
土壤总磷/有机磷/无机磷含量测试盒
通用型阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)基因检测试剂盒
纯化线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒
大鼠载脂蛋白H(Apo-H)elisa检测试剂盒
Syndecan 3蛋白抗体 Anti-Syndecan 3
抵抗素抗体 Anti-Resistin
NFKB激活蛋白抗体 Anti-NKAP
受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体 Anti-ZAR1L
肿瘤坏死因子诱导蛋白2抗体 TNFAIP2
轴突蛋白4/少突胶质细胞抗体 CASPR
睾丸特异性MLT5蛋白抗体 MLT5
骨形态发生蛋白6抗体 BMP6
L-型电压依赖型钙通道α抗体 CACNA1C
mScarlet单克隆抗体 mScarlet
人水痘带状疱疹病毒gE蛋白抗体 VZV gE
溶质载体家族蛋白34成员A1抗体 SLC34A1
CD2结合蛋白3抗体 CD2BP3
COX4NB蛋白抗体 COX4NB
磷酸化6丙酮酰四氢蝶呤合成酶PTPS抗体 phospho-PTS (Ser19)
磷酸化Src原癌基因重组兔单克隆抗体 phospho-Src (Tyr419)
巴尔得-别德尔综合征相关蛋白8抗体 TTC8
半胱氨酸蛋白酶抗体 Legumain
细胞质FMR1相关蛋白抗体 CYFIP1
心动加速蛋白多肽抗体 CCAP
大鼠抗凝血酶III(AT III)elisa分析检测试剂盒
大鼠颈动脉成纤维细胞γ-GCS ELISA kit
人琥珀酰辅酶A合成酶(SCS)elisa分析检测试剂盒
β-Amyloid 1-40; beta Amyloid(1-40); beta-Amyloid 1-40; beta-Amyloid 1-40; Amyloid 1-40; A4; AAA; ABETA; ABPP; AD1; Alzheimers Disease Amyloid Protein; Amyloid B; Amyloid Beta A4 Protein Precursor; Amyloid Beta; Amyloid of Aging and Alzheimer Disease; APP; APPI; B Amyloid; Beta APP; Cerebral Vascular Amyloid Peptide; CTFgamma; CVAP; PN II; PN2; PreA4; Protease nexin II; A beta; A4_HUMAN.
大鼠颈动脉成纤维细胞
兔腹腔主动脉平滑肌细胞
EJ-1[EJ1]人膀胱癌细胞
MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;