实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
卵巢不仅是卵子产生、生长并成熟的器官,也是脑垂体前叶分泌的靶器官之一。
其中,卵巢间质区是提供卵泡生长和发育的环境,卵巢间质主要由卵巢间质细胞构成。探明卵巢间质细胞的增值及功能,在发情周期和妊娠期发生变化的机理及调控因素,对进一步研究卵泡发育的调控、排卵、黄体形成和退化、卵巢、卵巢间质细胞瘤发病机理,以及在这些生理和病理过程中参与其中的及细胞因子作用机理均有重要意义。
组织来源
产品规格
货号
用途
卵巢组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1625
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常卵巢组织。
2)细胞鉴定:胆固醇侧链裂解酶(P450SCC)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代间质 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
MouseMicrotubule-associatedproteins1A/1Blightchain3B(MAP1LC3B)ELISAkit
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa分析检测试剂盒
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小鼠可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)elisa检测试剂盒免费代测
犬白介素1β(IL-1β)elisa分析检测试剂盒
细胞血红素氧合酶(HEME OXYGENASE)活性荧光定量检测试剂盒
肌球蛋白轻链7抗体
MYL7
3号染色体开放阅读框21抗体
C3orf21
跨膜蛋白158抗体 Anti-TMEM158
RNA结合蛋白片段Y染色体家族蛋白1抗体 Anti-RBMY1A1
核受体辅助抑制因子2抗体 Anti-NCoR2
可溶性载质转运蛋白SLC24A5抗体 Anti-SLC24A5
辣根过氧化物酶标记的兔抗亲和素
大鼠卵巢间质细胞Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5.5
肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白1抗体
GAL 3R; GAL R3; GAL3 R; GAL3-R; GAL3R; Galanin receptor 3; Galanin receptor-3; Galanin receptor family member 3; Galanin receptor type 3; GALN R3; GALNR 3; GALNR3; GALR 3; GALR-3; Galr3; GALR3_HUMAN.
大鼠卵巢间质细胞
兔肺微血管内皮细胞
HCT15/5Fu人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
MB49小鼠膀胱癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;