实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
舌表皮细胞经常轻度教化脱落，与唾液和食物碎屑混合而形成一层白色薄苔。表皮细胞的主要作用是保护，同时还兼有其他功能，如分泌角质层等，具有很强的角质化特征。
组织来源
产品规格
货号
用途
舌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1737
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常舌组织。
2)细胞鉴定：广谱角蛋白(PCK)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代 角质形成 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
U-TSHELISAKit
仓鼠白介素1α(IL-1α)elisa分析检测试剂盒
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植物脂质过氧化氢（H2O2）活性比色法定量检测试剂盒
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石蜡切片神经纤维银染（Bodian）试剂盒
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干扰素调节因子8抗体
IRF8
碳酸酐酶12抗体
CA12
明胶载玻片
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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）测试盒
细胞化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒（含一抗和AP二抗）
RAS相关蛋白Rab5B抗体
RAB5B
丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗体
JIP2
去泛素化酶3抗体 Anti-USP3
26S蛋白酶调节亚型S5a抗体 Anti-Proteasome 19S S5A
桥粒斑菲素蛋白2抗体 Anti-Plakophilin 2
信号诱导增殖相关蛋白1抗体 Anti-SIPA1
Cy5.5标记的羊抗兔IgG H&L
大鼠舌表皮细胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy5
线粒体二羧酸载体蛋白11抗体
Thimet Oligopeptidase; Endopeptidase 24.15; EP24.15; MEPD_HUMAN; MP78; Thimet oligopeptidase 1; Thop1; THOP1_HUMAN; EC 3.4.24.15.
大鼠舌表皮细胞
兔DRG神经元细胞
KG-1a人急性髓性白血病细胞
MDA-MB-436 人乳腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；