实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
肾是脊椎动物的一种器官,属于泌尿系统的一部分,负责过滤血液中的杂质、维持体液和电解质的平衡,后产生尿液经尿道排出体外;同时也具备的功能以调节血压。
周细胞是一种包围全身和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞产生手指状的外延以调控的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合。
组织来源
产品规格
货号
用途
肾组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1598
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常肾组织。
2) 细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代周 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
COX-2ELISAKit
猴皮质醇(COR)elisa分析检测试剂盒
COR ELISA kit
人防御素 elisa分析检测试剂盒
HumandefensinsELISAKit
SRPX2蛋白抗体 Anti-SRPX2
复制激活因子C1抗体 Anti-RFC1
蛋白激酶C结合蛋白NELL1抗体 Anti-NELL1
磷酸化原癌基因蛋白激酶Yes1抗体 Anti-phospho-YES1(Tyr426)
白介素31受体a抗体
IL31RA
1号染色体开放阅读框195抗体
C1orf195
通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒
大鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)elisa检测试剂盒
乳果糖待测样品处理试剂盒
小鼠白介素31(IL-31)elisa分析检测试剂盒
蛋白质磷酸酶1G抗体
PPM1G
肽酰tRNA水解酶ICT1抗体
ICT1
UL16结合蛋白3抗体 Anti-ULBP3/N2DL3
丙酮酸激酶-M2抗体 Anti-PKM2
磷酸二酯酶7抗体 Anti-PDE7A
磷酸化信号细胞活化分子CD150抗体 Anti-phospho-SLAMF1(Tyr281)
PE-Cy5.5标记的羊抗牛IgG H&L
大鼠肾周细胞小鼠噬酸性细胞趋化因子(Eotaxin)elisa检测试剂盒
人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)elisa分析检测试剂盒
FKH10; FKHL10; Forkhead (Drosophila) like 10; Forkhead box I1; Forkhead box protein I1; Forkhead like 10; Forkhead related activator 6; Forkhead related transcription factor 6; Forkhead-related protein FKHL10; FREAC 6; FREAC6; Hepatocyte nuclear factor 3 forkhead homolog 3; HFH 3; HFH3; HNF 3/fork head homolog 3; HNF-3 fork-head homolog 3; Human HNF-3 fork-head homolog-3 HFH-3 mRNA complete cds; MGC34197; FOXI1_HUMAN.
大鼠肾周细胞
人直肠上皮细胞
LS1034人结肠腺癌细胞
MDST8人结肠癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;