实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
心脏壁主要由心肌构成,心室壁比心房壁厚,其中,左心室比右心室壁厚,在心脏的四个腔中,左心室的心肌。心肌的工作细胞包括心房肌和心室肌。心肌细胞为短柱状,一般只有一个细胞核,心肌细胞之间有闰盘结构。心房与心室的心肌层不直接相连,它们分别起止于心房和心室交界处的纤维支架,形成各自独立的肌性壁,从而保证心房和心室各自进行独立的收缩舒张,以推动血液在心脏内的定向流动。
临床研究表明,心肌病是一组异质性心肌,表现为心室不适当的肥厚或扩张,可引起心血管性死亡或进展性心力衰竭。
组织来源
产品规格
货号
用途
心脏组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1529
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常心脏组织。本细胞为终末分化细胞,增殖能力很弱,建议客户收到细胞后直接用于后续实验,不要进行扩增培养。
2) 细胞鉴定:肌球蛋白重链(Myosin heavy chain)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:柱状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代心肌细胞培养体系 作为该细胞的体外培养试剂。
公司正在出售的产品:
土壤亮氨酸氨基肽酶(S- LAP) 测试盒
人CD30分子(CD30)elisa检测试剂盒
体液组织L(CATHEPSIN L)活性荧光定量检测试剂盒
小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)elisa检测试剂盒
大鼠肝X受体β(LXRβ)elisa检测试剂盒
细胞脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量检测试剂盒
谷胱甘肽-还原酶GR测试盒 50管 紫外比色法
植物组织细胞核高纯分离试剂盒
小鼠催乳素(PRL)elisa检测试剂盒
新朊蛋白抗体(C端) SPRN
嗅觉受体5J2抗体 OR5J2
大脑蛋白2抗体 Brain2
蛋白激酶样内质网激酶单克隆抗体 EIF2AK3/PERK
EXPH5蛋白抗体 EXPH5
FAM98C蛋白抗体 FAM98C
磷酸化细胞周期检查控制蛋白质抗体 phospho-RAD9 (Tyr28)
磷酸化转铁蛋白受体(CD71)抗体 phospho-TFRC (Ser24)
19号染色体开放阅读框45抗体 C19orf45
20号染色体开放阅读框27抗体 C20orf27
磺酰脲类受体1抗体 SUR1
肌球蛋白重链抗体 Fast Myosin Skeletal Heavy chain
PE标记人CD52单克隆抗体 human CD52/PE
PSMC2单克隆抗体 PSMC2
嗜酸性粒细胞阳离子型核糖核酸酶5抗体 Ear5
羧酸酯酶4A抗体 CES4A
大鼠50补体溶血单位(CH50)elisa检测试剂盒
大鼠心室心肌细胞CRF ELISA Kit
人降脂素(Adipsin)elisa分析检测试剂盒
LRR; CARD 12; CARD; CARD LRR and NACHT containing protein 1; CARD LRR and NACHT containing protein; CARD12; Caspase recruitment domain containing protein 12; Caspase recruitment domain-containing protein 12; CLAN 1; CLAN A; CLAN; CLAN B; CLAN C; CLAN D; Clan protein; CLAN1; CLANA; CLANB; CLANC; CLAND; CLR 2.1; CLR2.1; ICE protease activating factor; Ice protease-activating factor; Ipaf; NLR family CARD domain containing 4; NLR family CARD domain-containing protein 4; NLRC 4; NLRC4; NLRC4_HUMAN; and NACHT-containing protein.
大鼠心室心肌细胞
人胰腺癌细胞
AZ-521人胃癌细胞
MKN1人胃癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;