实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
主动脉瓣施半月瓣，位于左心室和主动脉之间，抑制射入主动脉的血液回流入左心室。
主动脉瓣钙化可引起主动脉瓣狭窄关闭不全等，施导致老年退行性心瓣膜病的重要病理改变，其发病率随着年龄的增加而升高。有研究表明，瓣膜间质细胞向城固细胞样细胞表型转化有可能是主动脉瓣膜钙化的病理改变基础之一。
组织来源
产品规格
货号
用途
主动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1549
仅供科研研究实验
细胞特性：
1） 组织来源于实验动物的正常主动脉组织。
2） 细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3） 经鉴定细胞纯度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5） 细胞生长方式：长梭形、不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf 原代间质 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)elisa分析检测试剂盒
干扰素调节因子8抗体
IRF8
碳酸酐酶12抗体
CA12
大鼠前列腺素E受体2(EP2)elisa检测试剂盒
过氧化氢处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒
豚鼠P物质(SP)elisa检测试剂盒
咖啡糖精（saccharin）含量比色法定量检测试剂盒
蛋氨酸亚砜还原酶B3抗体
MSRB3
脂肪酸去饱和酶6抗体
FADS6
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体 Anti-TNFAIP8
脱氢酶11/丙型肝炎核心蛋白抗体 Anti-RDH11
核凋亡诱导因子蛋白1 Anti-NAIF1 protein
磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 Anti-Phospho-Smad2(Ser245/250/255)
肿瘤抑制基因LPP2抗体
VANGL1
核小体组装蛋白1样蛋白6抗体
NAP1L6
富含脯氨酸突触相关蛋白SHANK1抗体 Anti-SHANK 1
α-中连蛋白抗体 Anti-NF66/alpha Internexin
维甲酸受体G抗体 Anti-RXR gamma
味觉受体蛋白家族2亚基5抗体 Anti-TAS2R5
大鼠复制蛋白A 70kDaDNA结合亚基(RPA1)elisa分析检测试剂盒
大鼠主动脉瓣膜间质细胞Mouse IgG / HRP
乙酰肝素酶2抗体
IL-18R Beta; Interleukin-18 receptor beta; Accessory protein like; IL18R Beta; AcPL; IL 18RacP; IL 1R accessor protein like; IL 1R7; IL 1RacPL; IL18Rbeta; Interleukin 18 receptor accessory protein; IL18RAP; Interleukin-18 receptor accessory protein-like; IL-18R-beta; IL-18Rbeta; Accessory protein-like; AcPL; Interleukin-1 receptor 7; IL-1R-7; IL-1R7; CD218 antigen-like family member B; CD218b; I18RA_HUMAN.
大鼠主动脉瓣膜间质细胞
人雪旺细胞
A-431人表皮鳞状细胞癌细胞
Mono-Mac-6人急性单核白血病细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；