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产品资料

人NK细胞

人NK细胞
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  • 产品名称:人NK细胞
  • 产品型号:
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
人NK细胞公司正在出售的产品:SK-MEL-2人黑素瘤细胞 囊泡胺转运蛋白1家族蛋白抗体 Col Ⅵ ELISA Kit Ⅵ型胶原检测试剂盒 磷酸化转录因子E2F-1抗体 SNU-228人肾细胞癌细胞
产品描述
人NK细胞

产品名称

NK细胞

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

组织来源

外周血。

生长特性

悬浮培养

细胞形态

悬浮细胞

分类

原代细胞

货号

A01X1447

用途

仅供科研实验

细胞特性:


1)细胞来源于外周血。

2)细胞鉴定:CD56CD16荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%

4)不含有 HIV-1 HBVHCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式:悬浮培养。

推荐培养基

我们推荐使用 DELF原代NK细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

细胞简介:

自然杀伤细胞 (natural killer cellNK)是机体重要的细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身性的发生。一种稳定表达在NKLAK细胞表面的LAK-1分子,120kDaNK细胞在IL-2条件下培养20LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。

自然杀伤细胞刺激因子( natural killer cell stimulatory factor,NKSF) NK细胞有刺激作

培养方法与步骤:

①动物处理:用颈椎脱白法处死使新生乳鼠断髓迅速死亡,然后将整个乳鼠浸入盛有75%酒精的烧杯中2~3秒(浸泡时间不能过长、以免酒精从口浸入体内,影响培养)后迅速置于的培养皿中,带入超净工作台内进行无菌操作取材。
②取材:将乳鼠俯卧位,用乙醇进行一次背部,再用的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤,剖开腹部,取出肝脏放入另一培养皿中,除去其他连带组织,用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次,每次1~2 ml,洗去血污,将废液弃于废液杯中。
③组织分离:用眼科剪和镊子将肝门区所附的血管结缔组织尽可能去除,然后将肝组织反复剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小块后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反复吹打清洗组织块儿3次,弃废液。
④接种:用吸管加2滴小牛血清,小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液,然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地(组织块之间相距约0.5 cm左右)排种在培养瓶底壁上; 每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。

⑤培养:将培养瓶慢慢翻转,使瓶底向上,加入1~2 ml培养液,拧紧瓶盖,做好标记,置 37 ℃恒温箱中培养1~2小时,待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后,再缓慢翻转培养瓶(尽量注意不要使组织块漂浮起来),另加入培养液2 ml左右使其能覆盖组织块,将瓶盖调整在略微松弛状态,继续置37 ℃恒温箱静放培养。

⑥观察:细胞接种后一般几个小时内即可贴壁,并开始生长。如果无污染且细胞生长良好,可见培养液颜色由原来的橘红色变成黄色,此时可补加或更换培养液。10~15天后可长成致密单层细胞,这时可进行传代培养。
原代细胞步骤


1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织,剔除包膜及坏死组织,无菌PBS清洗3-5次;切成约1mm3组织块;
2. 加入2mmol 的 EDTA,摇匀后放置冰上约 30-60min;
3. 离心,并加入胶原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期间,置于37°培养箱。每15min摇晃一次,消化时间根据肿瘤组织来定,约1-2h;
5. 待大部分组织块消化成透明状时,用 40μm 的细胞滤网过滤细胞,收集;
6. 用培养基重悬,置于培养箱培养。

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