实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
调节性 T细胞（Treg）是具有调节活性的T细胞亚群，在维持机体的耐受以及调控应答过程中发挥重要作用。
Treg细胞通过其表面表达一致性分子，分泌抑炎性细胞因子，直接发挥细胞毒作用以及改变抗原呈递细胞的抗原提呈功能而发挥调节作用。CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞属于CD4+T细胞亚群，占正常人外周血及脾脏组织中的CD4+T细胞的5%-10%。
组织来源
产品规格
货号
用途
外周血。
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1462
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于外周血。
2）细胞鉴定：CD4和CD25荧光染色为阳性。
3）经鉴定细胞纯度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5）细胞生长方式：悬浮培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代 T细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
石蜡切片组织PP2A蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒
大鼠热休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)elisa检测试剂盒
体液HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性检测试剂盒
豚鼠白介素5(IL5)elisa检测试剂盒
转化生长因子β1抗体 Anti-TGF Beta 1/2/3
核糖核酸酶抑制因子1抗体 Anti-Ribonuclease Inhibitor
神经激肽B抗体 Anti-NKB
血管活性肠肽受体-1抗体 Anti-VIP Receptor 1/VAPC1
腺苷A1A受体抗体 ADORA1
心脏特异性丝氨酸蛋白酶抗体 Corin
白介素31受体a抗体 IL31RA
胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体 Anillin
CD5抗体 CD5
C端结合蛋白1抗体 CTBP1
磷酸化FANCD2抗体 phospho-FANCD2 (Ser222)
磷酸化叉头蛋白家族1(Ser319)抗体 Phospho-FoxO1 (Ser319)
猪胃蛋白酶抗体 Pepsin A
转录因子LMCD1抗体 LMCD1
光导蛋白样蛋白PDCL抗体 PHLP
核呼吸因子-1抗体 NRF1
myc蛋白抗体 Myc
NMDA受体调节1样蛋白抗体 NARG1L
溶质载体转运蛋白家族35成员D3抗体 SLC35D3
神经细胞PAS结构域蛋白2抗体 NPAS2
人蛋白磷酸酶1B(PTP1B)elisa分析检测试剂盒
人Treg细胞尼氏染色试剂盒(焦油紫法)2×100ml
大鼠髓细胞触发受体1(TREM1)elisa检测试剂盒
Laminin alpha 3; LAMNA; Laminin subunit alpha-3; Laminin-5 subunit alpha; Laminin 5 alpha 3; Laminin-6 subunit alpha; Laminin-7 subunit alpha; Epiligrin 170 kDa subunit; E170; Epiligrin subunit alpha; Kalinin subunit alpha; Nicein subunit alpha, BM600; LOCS; LAMA3_HUMAN.
人Treg细胞
人小肠成纤维细胞
BPH-1(前列腺增生细胞)
MUTZ-8人急性髓细胞白血病细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；