实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
胆囊,是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造,有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成。胆囊内面以粘膜覆盖,有发达的皱襞。胆囊收缩排空时,皱襞高大而分支;胆囊充盈时,皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状,内分散分部着少量杯状细胞。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征,具有较强的吸收和浓缩功能,上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐,经细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内,吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和管内。同时,胆囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。
组织来源
产品规格
货号
用途
胆囊组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1296
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常胆囊组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白19(CK-19)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
PICOGREEN细胞繁殖定量检测试剂盒
LYPD3抗体
LYPD3
11号染色体开放阅读框67抗体
C11ORF67
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 Anti-STSL/ABCG8
环指蛋白130抗体 Anti-RNF130
钠钾离子转运蛋白1抗体 Anti-NKCC1
锌指蛋白ZBTB6抗体 Anti-ZBTB6/ZNF482
OVOL1蛋白抗体
OVOL1
钙粘蛋白20抗体
Cadherin 20
转移生长因子β3抗体(TGFβ3) Anti-TGF beta 3 propeptide
过氧化还原酶3抗体 Anti-PRDX3/peroxiredoxin 3
蛋白酶调解因子7抗体 Anti-PSMD7
5-羟色胺受体7抗体 Anti-5HT7 Receptor/SR-7
丝裂原活化蛋白激酶6抗体
phospho-MAPK6 (Ser189)
E4F转录因子1抗体
E4F1
锌指蛋白772抗体 Anti-ZNF772
神经肽S抗体 Anti-NPS/Neuropeptide S
环指蛋白14抗体 Anti-RNF14
SPG48蛋白抗体 Anti-SPG48
大鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)elisa分析检测试剂盒
人胆囊上皮细胞Rabbit Anti-Bovine IgM / Cy7
FAS凋亡抑制分子1抗体
GFRP 1; GFRP; GFRP1; Growth factor inducible nuclear protein N10; Growth Factor Inducible Nuclear Protein NP10; Growth Factor Response Protein 1; Hbr1; HMR; Hormone Receptor; MGC9485; N10; N10 nuclear protein; NAK 1; NAK1; NGFIB; NP 10; NP10; NR4A1; Nuclear hormone receptor NUR/77; Nuclear Hormone Receptor TR3; Nuclear Receptor Subfamily 4 Group A Member 1; NUR77; Orphan nuclear receptor HMR; Orphan nuclear receptor NR4A1; ST 59; ST59; Steroid receptor TR3; TR 3; TR3; TR3 orphan receptor; Early response protein NAK1.
人胆囊上皮细胞
人胎盘绒毛膜间质细胞
CCD-18Co(正常人结肠成纤维细胞)
NCI-H1437人非小细胞肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;