实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
附睾是一个多数曲折、细小的管子构成的器官,一面连接着输精管,一面连接着睾丸的曲细精管。当精子离开睾丸时,就跑到附睾里,继续生长成熟。附睾管除贮存精子外还能分泌附睾液,其中含有某些、酶和特异的营养物质,它们有助于精子的成熟。附睾管由黏膜、肌层和外膜组成。其中,粘膜层主要是由粘膜上皮细胞构成。
组织来源
产品规格
货号
用途
附睾组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1382
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于人的正常附睾组织。
2)细胞鉴定:PCK荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
大鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)elisa检测试剂盒
组蛋白H3-K18(mono)甲基化检测试剂盒
小鼠甘油三酯(TG)elisa检测试剂盒
鸡甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa分析检测试剂盒
体液总脂蛋白(Total L-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒
SEL1L抗体 Anti-SEL1L
环指蛋白166抗体 Anti-RNF166
间变性瘤激酶核相互作用伴侣蛋白抗体 Anti-NIPA
糖类应答元件结合蛋白ChREBP抗体 Anti-WBSCR14/ChREBP
钠钾ATP酶通道蛋白抗体 ATPase Na+/ K+ beta 2
内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体 PAI1
FITC标记人TCR α/β单克隆抗体 human TCR α/β/FITC
FUT4单克隆抗体 FUT4
亚硫酸盐氧化酶抗体 Sulfite oxidase
胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体 IGF2BP2
电压门控性钾通道Kv2.2抗体 Kv2.2
多聚腺苷酸结合蛋白4抗体 PABPC4
通用转录因子2H亚基2C抗体 GTF2H2C
突触融合蛋白结合蛋白5抗体 Tomosyn/STXBP5
RecQ解旋酶样蛋白5抗体 RECQL5
S100钙结合蛋白A11抗体 S100A11
5-羟色胺受体3A抗体 5HT3A Receptor
9号染色体开放阅读框173抗体 C9orf173
甲基化CpG结合蛋白MBD6抗体 MBD6
腈水解酶1抗体 NIT1
顶体形态豌豆凝集素荧光标记(PSA-FITC)染色试剂盒
人附睾管上皮细胞Rabbit Anti-human IgG heavy chain constant region whole serum
γ-谷氨酰基环转移酶抗体
RGC32; Chromosome 13 open reading frame 15; KIAA0564; MGC87338; response gene to complement 32; Response gene to complement 32 protein; RGC 32; RGCC_HUMAN.
人附睾管上皮细胞
人视网膜色素上皮细胞
人胚肺成纤维细胞;IMR-90
NCI-H1672 [H1672] 人小细胞肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;