实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
颈位于下部，近似圆锥体，长 2.5～75px，上端与体相连，下端深入。宫颈的大小与宫体比例随年龄及状态等而变化。宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。其中，外膜是由成纤维细胞构成。
组织来源
产品规格
货号
用途
**组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1374
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于人正常组织。
2)细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：长梭形，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
IFI16/p16ELISAKit
鱼白三烯B4(LTB4)elisa分析检测试剂盒
LT-B4 ELISA Kit
人丙二酸单酰辅酶A(malonyl CoA)elisa分析检测试剂盒
HumanmalonylcoenzymeAELISAKit
细胞周期蛋白SG2N抗体 Anti-Striatin 3/SG2NA
环指蛋白213 Anti-RNF213
神经元钙结合相关蛋白EFCBP1抗体 Anti-NECAB1/EF-CBP1
DNA补充修复XPC细胞蛋白抗体 Anti-XPC
脂多糖结合蛋白抗体
LBP
卵黄状黄斑病蛋白2抗体
Bestrophin 2
短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体 Anti-SCHAD/HADHSC
磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体 Anti-Phospho-RSK2 (Ser227)
利钠肽受体C抗体 Anti-NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C
磷酸化ZCWCC1抗体 Anti-phospho-ZCWCC1 (Ser739)
SH3结构域激酶结合蛋白1抗体
SH3KBP1
COBL蛋白抗体
Cordon bleu homolog
跨膜蛋白SEMA4A抗体 Anti-SEMA4A
孤儿核受体PAR1抗体 Anti-PXR
脑特异性多肽蛋白19抗体 Anti-PCP4/PEP-19
TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体 Anti-TNIK
兔抗马IgG抗血清
人宫颈成纤维细胞Mouse Anti-Rabbit IgG H&L / Cy5
牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗体
NR2C2_HUMAN; Nuclear hormone receptor TR4; Nuclear receptor subfamily 2 group C member 2; Orphan nuclear receptor TAK1; Orphan nuclear receptor TR4; TAK1; Testicular nuclear receptor 4; Testicular receptor 4; TR2R1; TR4; TR4 nuclear hormone receptor.
人宫颈成纤维细胞
人肾上腺包膜成纤维细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞；ACC-3 (STR)
NCI-H1944人非小细胞肺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；