实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
颊黏膜位于上、下牙的咬合部位,是口腔黏膜的一个特定区,通常为口腔和上喉分泌保湿剂和润滑剂。
颊粘膜的组织结构与唇黏膜相似,固有层结缔组织致密,黏膜下层较厚。颊粘膜通过黏膜下层附着再颊肌上,具有一定张力,在咀嚼肌肥大和黏膜增厚的情况下,颊白线增厚,弥漫性水肿和肿胀,有时变红,延伸至近牙齿。
组织来源
产品规格
货号
用途
颊黏膜组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1486
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于人正常颊黏膜组织。
2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)elisa检测试剂盒
小鼠G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)elisa分析检测试剂盒
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MEM培养基 500ml
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石蜡切片组织CASPASE-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)测试盒
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G氨基丁酸A型受体α2/GABAA Rα2抗体 GABRA2
膜突蛋白重组兔单克隆抗体 Moesin
脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体 GLIPR1
多功能DNA修复酶抗体 APEX1
泛素蛋白连接酶C抗体 UBE2C
血清淀粉样蛋白A单克隆抗体 Human SAA1
野生型P53诱导基因1抗体 PAG608
RYK单克隆抗体 RYK
SHISA3蛋白抗体 SHISA3
糖基转移酶GLT8D2抗体 GLT8D2
铜代谢结构域蛋白10抗体 COMMD10
钾离子通道多聚体结构域蛋白8抗体 KCTD8
酵母肌动蛋白(内参)抗体 Beta Actin (Yeast, Loading Control)
3-磷酸甘油醛脱氢酶 GAPDH
9号染色体开放阅读框135抗体 C9orf135
大鼠微管相关蛋白2(MAP-2)elisa检测试剂盒
人颊黏膜成纤维细胞大鼠结合珠蛋白(Hpt)elisa检测试剂盒
细胞腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase)活性荧光定量检测试剂盒
BPI fold containing family B, member 1; long palate, lung and nasal epithelium carcinoma associated 1 isoform 1; chromosome 20 open reading frame 114; C20orf114; Long palate; BPIB1_HUMAN; Lplunc1; lung and nasal epithelium carcinoma-associated protein 1; VEMSGP; Von Ebner minor salivary gland protein; MGC14597; MGC156708; RGD1563047; RP23-154J12.1; U46068.
人颊黏膜成纤维细胞
人前列腺上皮细胞
人滑膜肉瘤细胞; SW 982 (STR)
NCI-H2126 人肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;