实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
结肠在右髂窝内续于盲肠,在第 3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母M,将小肠包围在内。
结肠癌发病主要与高脂肪和低纤维素饮食有关。结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤。好发于直肠与乙状结肠交界处。其发病率占胃肠道肿瘤的第三位。结肠癌主要分为腺癌、粘液腺癌和未分化癌。
组织来源
产品规格
货号
用途
结肠癌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1319
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于人结肠癌组织。
2)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
3)细胞生长方式:梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代肿瘤细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
BTAELISAKit
鱼细胞色素C氧化酶(COX)elisa分析检测试剂盒
COX ELISA kit
人成纤维细胞生长因子4(FGF4)elisa分析检测试剂盒
HumanFGF4ELISAkit
驱动蛋白(kinesin)型ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒
鸡白介素10(IL-10)elisa分析检测试剂盒
8%蛋白电泳分离预制胶溶液
小鼠钙卫蛋白(CALP)elisa分析检测试剂盒
NK细胞抑制性受体2DS3抗体
KIR2DS3
嗜铬粒蛋白C抗体
Chromogranin C
小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa检测试剂盒
大鼠促肾上腺皮质释放因子(CRF)elisa分析检测试剂盒
血液一氧化氮(NO)活性荧光定量检测试剂盒
人丙酮醛(MGO)elisa检测试剂盒
肠炎沙门氏菌抗体
Salmonella enteritidis
LANCL3蛋白抗体
LANCL3
分选连接蛋白1抗体 Anti-SNX1/Sorting nexin1
骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体 Anti-PARL
富含脯氨酸/丝氨酸卷曲螺旋蛋白1抗体 Anti-PSRC1
肿瘤血管内皮标志物8抗体 Anti-TEM8
兔抗小鼠k链
人结肠癌细胞组织II型L-3羟酰基-CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒
苏木素染色液50ml
MAY 1; MAY1; nPKC delta; PCKd; PKC d; PKC delta; PKC-d; PKCD; PKCdelta; PRKC D; PRKC delta; PRKC-d; PRKCd; Protein Kinase C delta; Protein kinase C delta type; Protein Kinase Cdelta; KPCD_HUMAN; PKC δ.
人结肠癌细胞
人脐静脉平滑肌细胞
人葡萄膜黑色素瘤;92-1[Human uveal melanoma] (STR)
NCI-H2228人肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;